成功转化到大肠杆菌之后，却始终得不到有活性的胰岛素，为什么？
胰岛素在真核细胞中合成的过程，即分泌蛋白的合成和分泌过程，直接参与的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体，特别是内质网和高尔基体对蛋白质进行加工，形成具有一定空间结构的蛋白质，从而体现出生物活性。而大肠杆菌是原核细胞，没有内质网、高尔基体等复杂的细胞器，所以即使成功转化到大肠杆菌的细胞内也不能合成有活性的胰岛素。
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第1个回答 2012-01-04
这正是E.coli表达体系的不足之处，它缺乏转录后的加工机制和适当的翻译加工机制。真核表达体系常见的有酵母、昆虫、哺乳类细胞等。重要的是将重组体导入细胞，即转染。常见转染方法：磷酸钙转染，DEAE葡萄糖介导转染，电穿孔、脂质体转染及纤维注射等。其次是转染后的细胞筛选，主要依赖特异性抗性标志。
第2个回答 2011-12-27
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