原核表达产物的鉴定方法

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大体分为一下几步:1.设计目的片段引物(含限制性酶切位点,要求:表达载体上有而目的片段上没有的酶切位点)2.PCR扩增片段3.扩增后的片段与pMD18/19T克隆载体连接,通过蓝白斑筛选,提质粒并酶切鉴定;将正确连接的克隆载体重组质粒酶切,回收目的片段4.目的片段与表达载体连接5.转化到DH5a等克隆菌株,通过抗生素筛选,鉴定表达重组质粒。6.测序检测7.正确的表达重组质粒再转到表达菌株8.表达
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