pcr后,跑电泳没有条带,重复过几次,什么原因

如题所述

第1个回答  2017-01-25
正常操作实验中提取质粒应该出现2条条带,由于空间结构的差异,从上至下第一条为较为松散的DNA环状结构,第二条是环状DNA超螺旋结构,有时往往会存在第三条带(出现在松散环状质粒DNA条带上方),即为DNA开环结构(由于质粒提取过程中闭合环状DNA遭到破坏,环状结构打开变为直链DNA)。
质粒DNA电泳会有三条带,最远的是线形DNA(lDNA):质粒的两条链均断裂;线性分子;中间的是开环DNA(ocDNA):质粒的一条链断裂;松弛的环状分子;共价闭合环状DNA(cccDNA):质粒的两条链没有断裂;超螺旋这是由于在质粒提取过程中,机械力、酸碱度、试剂等的原因,使质粒DNA链发生断裂.而质粒DNA相对于基因组DNA小很多,所以比较容易区分开基因组DNA电泳一般是1条带,虽然在你抽提过程中也会发生断裂,形成几十至几百kb的大片段.但是我们一般用1%的胶,无法区分不同大小的DNA,所以看起来像是一条带.如果配成0.6%的胶再加lamda hindIII marker,适当延长跑胶时间,就应该会出现几条带了本回答被网友采纳

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