希望表达的目的基因也是要做个对照即不加诱导剂的吗?那在目的基因中诱导剂加多少啊,与对照的相比,为什么要加这么多对照呢,那是不是就是要一个基因至少得在跑胶时点四个样啊,
假如做一个基因的表达是不是得有空质粒不加诱导剂对照、空质粒加诱导剂对照、连上载体的目的基因不加诱导剂对照、连上载体的目的基因加诱导剂表达,这四种才能看出目的基因的表达吧
因为你做的并不是纯化的蛋白电泳,而是菌体的总蛋白,如果不作对照的话,就不能说明哪个条带是你的目的基因的特异表达。
如果做目的基因不加诱导剂的对照的话,可以看出目的基因在不诱导下的本底表达水平。也可以看出诱导剂的作用。
我们实验室就是那么做的,有时候还会加空菌(宿主菌)的对照。
如果做目的基因不加诱导剂的对照的话,可以看出目的基因在不诱导下的本底表达水平。也可以看出诱导剂的作用。
我们实验室就是那么做的,有时候还会加空菌(宿主菌)的对照。
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第1个回答 2010-09-18
你只要把连上目的基因的质粒加不加诱导剂就行了,一般都能诱导出来的,如果不能再去考虑失败愿意,再做那些也不迟。一般用IPTG的话,1M的IPTG按1/1000--1/3000的比例加。其他的我就没做过了