如题所述
当原核细胞尝试表达真核基因的cDNA时,一个关键的因素是密码子的偏好性。这种偏好性在真核细胞中表达非自身来源的基因,如真核基因的cDNA拷贝或者没有内含子的基因时,可能会引发一系列的独特问题。特别地,富含AT的基因在很多真核细胞环境中遭遇表达难题,因为它们可能遇到严重的障碍。例如,常见的真核信号序列,如poly-A尾部添加位点、酵母的转录终止位点和mRNA的稳定性调控序列,其序列特性往往偏向AT丰富。
内含子序列通常也富含AT,尽管它们具有特定的剪切识别序列。虽然大多数原核基因不涉及剪切或聚腺苷过程,但这些真核过程所需的保守序列可能在原核基因中存在。因此,当原核基因在真核细胞中表达时,这些保守序列可能会引发特有的问题。此外,哺乳动物和单子叶植物等特定的真核表达系统可能并不高效地支持无内含子基因的表达,这需要额外的适应和优化才能确保其功能的正常发挥。
扩展资料
随着人类基因组计划的完成,蛋白表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。越来越多的基因被发现,其中多数基因功能不明,利用蛋白表达系统表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。根据不同的表达要求,如表达量高低、目标蛋白的活性和表达产物的纯化方法,可选用适当的表达系统及相应的表达策略。
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