已找到同源基因，请说出大概步骤。
看来是要研究的物种没有测序咯
首先根据同源基因比对，然后在保守区域设计间并引物，先将保守区域克隆。然后根据保守区域设计基因特异引物，进行5’RACE及3’RACE，分别拿到保守区域两端的片断，然后序列拼接，拼出全长序列后，在基因两端设计一对引物将基因全长CDS克隆。
表达策略：1 反向遗传学：克隆的CDS可以亚克隆到特定的表达载体，并转基因到特定的物种（如果本物种的转基因体系尚未建立或很困难，可以先转入一些模式生物），按需要在各种启动子的驱动下在生物体内表达，观察表型；同时可以根据该CDS序列，设计RNAi载体，转基因，观察表型。如果需要，可以克隆该基因本身的启动子，然后让其驱动该基因或RNAi片断表达。
2 体外表达：可以利用大肠杆菌、酵母系统，在体外做一些原核或真核的表达。用以研究酶活，制备抗体等。
首先根据同源基因比对，然后在保守区域设计间并引物，先将保守区域克隆。然后根据保守区域设计基因特异引物，进行5’RACE及3’RACE，分别拿到保守区域两端的片断，然后序列拼接，拼出全长序列后，在基因两端设计一对引物将基因全长CDS克隆。
表达策略：1 反向遗传学：克隆的CDS可以亚克隆到特定的表达载体，并转基因到特定的物种（如果本物种的转基因体系尚未建立或很困难，可以先转入一些模式生物），按需要在各种启动子的驱动下在生物体内表达，观察表型；同时可以根据该CDS序列，设计RNAi载体，转基因，观察表型。如果需要，可以克隆该基因本身的启动子，然后让其驱动该基因或RNAi片断表达。
2 体外表达：可以利用大肠杆菌、酵母系统，在体外做一些原核或真核的表达。用以研究酶活，制备抗体等。
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第1个回答 2010-03-29
如果找不到同源基因，就用图位克隆吧。
