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既然是受精卵染色体DNA 那就是真核细胞
向原核细胞中导入外源目的基因可以通过质粒,而在真核细胞质粒虽然可以导入,但它的表达可能会出现问题,因为质粒是原核生物的DNA序列,而原核生物的DNA转录及翻译机制与真核生物有很大不同
要将外源基因导入到真核细胞的方法主要有
1、物理方法:(1)DNA直接注射法: 最简单方法, 但注入量有限,表达成功率低
(2)颗粒轰击技术:用金属包被目的基因包,利用高压发射装置,促使包裹目的基因的金属颗粒进入细胞,从而提高肿瘤细胞的转化率。
2、化学方法:【用化学方法构建非病毒载体系统】
(1)脂质体载体:安全、简单、低毒、无免疫原性等优点,效率较高
(2)受体介导法:靶向性好,但受体介导的内吞小泡易被溶酶体降解而造成目的基因表达时间短暂,表达效率低下
3、生物方法:【通过构建病毒载体来完成】
(1)逆转录病毒 (2)腺病毒 (3)单纯疱疹病毒 (4)腺相关病毒 (5)其它病毒 如痘苗病毒、杆状病毒等
导入真核的外源基因的表达方式有两种,
一种是瞬时转染。这种瞬时表达是由一些强启动子控制,使目的基因在真核细胞内瞬时强行表达,表达的过程无非还是转录翻译。不过这种以环形质粒导入细胞的瞬时转染质粒很容易在复制时丢失。
另一种叫稳定转染。这种一般是腺病毒载体或其他稳定转染载体,他们是以线性方式整合到真核细胞基因当中,和真核基因一样的表达,并拥有自己的启动子,这种表达方式比较温和,也会随真核细胞的分裂而遗传。
希望这样说 对你有所帮助
向原核细胞中导入外源目的基因可以通过质粒,而在真核细胞质粒虽然可以导入,但它的表达可能会出现问题,因为质粒是原核生物的DNA序列,而原核生物的DNA转录及翻译机制与真核生物有很大不同
要将外源基因导入到真核细胞的方法主要有
1、物理方法:(1)DNA直接注射法: 最简单方法, 但注入量有限,表达成功率低
(2)颗粒轰击技术:用金属包被目的基因包,利用高压发射装置,促使包裹目的基因的金属颗粒进入细胞,从而提高肿瘤细胞的转化率。
2、化学方法:【用化学方法构建非病毒载体系统】
(1)脂质体载体:安全、简单、低毒、无免疫原性等优点,效率较高
(2)受体介导法:靶向性好,但受体介导的内吞小泡易被溶酶体降解而造成目的基因表达时间短暂,表达效率低下
3、生物方法:【通过构建病毒载体来完成】
(1)逆转录病毒 (2)腺病毒 (3)单纯疱疹病毒 (4)腺相关病毒 (5)其它病毒 如痘苗病毒、杆状病毒等
导入真核的外源基因的表达方式有两种,
一种是瞬时转染。这种瞬时表达是由一些强启动子控制,使目的基因在真核细胞内瞬时强行表达,表达的过程无非还是转录翻译。不过这种以环形质粒导入细胞的瞬时转染质粒很容易在复制时丢失。
另一种叫稳定转染。这种一般是腺病毒载体或其他稳定转染载体,他们是以线性方式整合到真核细胞基因当中,和真核基因一样的表达,并拥有自己的启动子,这种表达方式比较温和,也会随真核细胞的分裂而遗传。
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