如题所述
Nus tag标签长约60多个kD，在与墓地蛋白共表达时很容易形成可溶性表达，这是这个载体的优点，但是其标签太大，对功能试验是非常不利的，因为它可能会将你的目的蛋白包围，或者对目的蛋白的抗原位点形成空间位阻，使其不能充分与抗体结合，从而影响ELISA试验结果，所以你在做ELISA实验之前应该将空载体做表达，纯化出标签蛋白，标签蛋白和重组蛋白同时做ELISA，如果重组蛋白称阳性反应，而标签蛋白称阴性反应，你就不用切除标签了，但是如果标签蛋白和抗体也能反应，或者重组蛋白和抗体没有反应，那么你就需要切除标签了，这个标签切除工作不是很可行，首先是工作量大，其次是因为目的蛋白是在标签的作用下才形成可溶性的，如果切除了标签，你的目的蛋白可能也就变成了不溶性沉淀了，我切过几次，但是结果都没有切开，不过我见过有人切成功的，你可以试一试。追问
明白了谢谢啊。
再另外问你一个问题：在看质粒图谱时，抗性基因可启动子的方向往往相反，说是可以降低本底表达，什么是本底表达啊，为什么方向相反就能抑制本底表达呢？ 麻烦了
本底表达指与外源基因表达产物相同的宿主自身基因的表达，在检测外源基因的表达量时应扣除本底表达。
减少本底表达就是为了方便目的蛋白的纯化，尽量做到后续纯化步骤简捷，同时也为了得到更高目的蛋白的表达，因为本底表达过高会造成目的蛋白表达的减少
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