如题所述
常用的为高拷贝质粒(120~ 200个/ 细胞),含有多克隆位点,以满足多种内切酶切割的DNA段的克隆、PUC 质粒载体的结构类型包括以下四个组成部分:
(1)pBR322质粒的复制起点(ori);
(2)氨苄青霉素抗性基因(amp),但该核苷酸序列经过改造,没有原限制性核酸内切酶的单识别位点;
(3)大肠杆菌β-半乳糖酶基因(lacZ)的启动子及其编码a-肽链的DNA序列(即lacZ'基因);
(4)位于IacZ'基因中的靠近5'端引入了一段多克隆位点(MCS)区段,但它不会引起编码肽链功能的改变。
(1)克隆载体:具有克隆载体的基本元件(Ori,Ampr,MCS 等),可以携带DNA 片段或外源基因进入受体细胞并克隆和大量扩增DNA 片段(外源基因)的载体;
(2)表达载体:这种载体中加入一些与表达调控(具有转录/翻译所必需的DNA 序列)有关的元件即成为表达载体。
质粒通常被定义为圆形的、双链的染色体外DNA。我们知道,每个细胞都有一个细胞核或核区域,包含了细胞的所有遗传物质。但原核细胞和部分真核细胞,拥有额外的DNA,能独立于细胞染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子。这个额外的DNA被称为质粒。它是双股的,通常是圆形的,这意味着它连接在一起形成一个圆。
天然DNA质粒大都具有共价、封闭、环状的分子结构,其分子量范围:1-300 kb。
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