诱导式IPTG的浓度应该好多？要试验确定吗

一、需要做实验确定，诱导时IPTG的浓度一般情况是1mg/ml，不过有的蛋白有时不需要这么高的浓度。

二、可以做一个梯度诱导，一般在菌浓OD600达到0.8－1.0的时候诱导。

三、培养两个小时候后，每隔一小时取样，大约在3－5小时的时候蛋白表达达到最高值，最后收菌后，加上以前的取得样品跑SDS-PAGE胶检验蛋白表达。

四、如果是酶的话就可以测定酶活确定，再跑SDS-PAGE胶检验溶解蛋白和包涵体的差异。

扩展资料：                       

IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。

基于这个特性，当pUC系列的载体DNA（或其他带有lacZ 基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时。

如果在平板培养基中加入X–gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。

此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。   

E.coli的乳糖操纵子（元）含Z、Y及A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、渗透酶和乙酰基转移酶，此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节 基因I。

I基因编码一种阻遏蛋白，后者与O序列结合，使操纵子（元）受阻遏而处于关闭状态。在启动序列P上游还有一个分解（代谢）物基因激 活蛋白（CAP）结合位点。

由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成lac操纵子的调控区，三个酶的编码基因即由同一调控区调节，实现基因产物的协调表达 。

参考资料来源：百度百科——IPTG