请举出五种研究基因表达调控的方法,并简单说明之。

如题所述

【答案】:(1)DNA酶Ⅰ超敏感分析:活跃转录的基因存在于结构松散的常染色体上,较少受到蛋白质的保护因而易受核酸内切酶DNA酶Ⅰ的攻击,特别是基因转录调控位点。
(2)DNA甲基化分析:DNA上特定CpG序列处的胞嘧啶甲基化修饰对基因表达有抑制作用。检测DNA的甲基化状态有助于了解该基因的转录活性。
(3)体外转录:建立一个无细胞体系进行体外转录,可对反应条件进行控制,便于研究顺式调控元件和反式作用因子的功能。
(4)核转录分析:在细胞核抽提物中加入放射性核素标记的核苷三磷酸,使其掺入到正在转录的mRNA分子中。通过核酸分子杂交方法,即可同时鉴定出多种不同的基因是否转录及其转录的量。
(5)建立差示文库:差示文库是反映不同组织或同一种细胞处于不同功能状态下的基因表达差别的cDNA文库。它反映了某细胞中特异性表达的基因。
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