shrna构建载体后测序突变了一个碱基还能用吗

我想，问题可能出现在以下几个环节：1.PCR是否成功？如果跑胶后目的片段的条带位置正确，可基本确定成功。2.胶回收是否成功？胶回收后是否跑胶查看浓度？3.SmaI酶切体系是否正确？通常酶量不能超过体系1/10，否则甘油会妨碍酶切的进行。4.通

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