科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—，据图回答：
根据图示分析，在构建基因表达载体过程中，应用限制酶1 切割质粒，用限制酶2 酶切割目的基因.
我要问的是为上面目的基因要用2切？2切了不是还剩有GGATCC吗，那质粒上不还是2个标记基因？。。。不太懂啊最近。。。最好给我详细解释下，谢谢、
用限制酶2 酶切割目的基因是因为目的基因左边是GGATCC，右边是GATC。切割目的基因是为了把目的基因切断，而不是把目的基因切开。如果用酶1切的话，只能切开目的基因的一处，而要把目的基因切断就要切两处。限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—，正好两边都有这个序列。所以要用酶二切。
温馨提示：答案为网友推荐，仅供参考
第1个回答 2010-08-17
首先你要看清题目
限制酶1的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶2的识别序列和切点是—↓GATC—。
也就是限制酶2可以切—↓GATC—和—G↓GATCC—这两种位点，但是限制酶1不能切—↓GATC—，因为后者少了一个G，限制酶1不能识别。
所以目的基因两端是两种序列，只能用限制酶2切，这样两端都可以识别切出
而质粒上只能用限制酶1切，这样可以保证唯一的切入点，只破坏了抗氨苄青霉素的基因。
然后筛选转化基因，可以寻找对青霉素无抗性，但对四环素有抗性的细菌，就是我们转化成功的工程菌。
限制酶1的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶2的识别序列和切点是—↓GATC—。
也就是限制酶2可以切—↓GATC—和—G↓GATCC—这两种位点，但是限制酶1不能切—↓GATC—，因为后者少了一个G，限制酶1不能识别。
所以目的基因两端是两种序列，只能用限制酶2切，这样两端都可以识别切出
而质粒上只能用限制酶1切，这样可以保证唯一的切入点，只破坏了抗氨苄青霉素的基因。
然后筛选转化基因，可以寻找对青霉素无抗性，但对四环素有抗性的细菌，就是我们转化成功的工程菌。
第2个回答 2010-08-17
因为目的基因插入Gene2，这个标记基因就被破坏了，不能正常表达
只剩下Gene1这个标记基因了
只剩下Gene1这个标记基因了
