如题所述
以我个人的实验经历来说:
首先,我会先在基因水平鉴定,先提DNA或质粒,通过PCR、双酶切、测序等等方法鉴定细胞中存在目的基因。
然后在蛋白水平,所表达的目的蛋白如果带有荧光蛋白的话往往可以通过显微镜观察出来,如果带有标签蛋白的话(如His标签),一般也可以过柱子纯化出来。如果都没有的话,可以通过WB进行鉴定,或者通过蛋白电泳观察条带对应的分子量大小是否与目的蛋白大小相同。
首先,我会先在基因水平鉴定,先提DNA或质粒,通过PCR、双酶切、测序等等方法鉴定细胞中存在目的基因。
然后在蛋白水平,所表达的目的蛋白如果带有荧光蛋白的话往往可以通过显微镜观察出来,如果带有标签蛋白的话(如His标签),一般也可以过柱子纯化出来。如果都没有的话,可以通过WB进行鉴定,或者通过蛋白电泳观察条带对应的分子量大小是否与目的蛋白大小相同。
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