头天晚上在试管中活化菌种，第二天上午将菌种转入大三角瓶中扩培，本应该是30℃培养4-6个小时至菌体到达一定浓度后再加IPTG，但是错误的在扩培的一开始就将IPTG加到大三角瓶中了，这样的话，30℃6个小时接着再20℃24h，能否诱导出蛋白？
也可以诱导出蛋白，本人曾经在实验中也遇到过类似情况。
IPTG之所以在诱导阶段加入，目的在于尽量减少大量表达蛋白（通常需要表达的蛋白也是工程菌所不需要的）对菌体生长的影响，便于较早达到所需菌体浓度，利于诱导阶段大量表达蛋白。题主提到的这个问题，一般来说可能会对菌体的生长速度产生影响，某些较敏感的蛋白有可能会形成包涵体，或是浓度有所变化，但是表达出蛋白应该是没问题的。
不过建议提蛋白时候最好检测一下，如果浓度或是可溶性不合要求尽早弃掉，重新诱导以免影响实验。
IPTG之所以在诱导阶段加入，目的在于尽量减少大量表达蛋白（通常需要表达的蛋白也是工程菌所不需要的）对菌体生长的影响，便于较早达到所需菌体浓度，利于诱导阶段大量表达蛋白。题主提到的这个问题，一般来说可能会对菌体的生长速度产生影响，某些较敏感的蛋白有可能会形成包涵体，或是浓度有所变化，但是表达出蛋白应该是没问题的。
不过建议提蛋白时候最好检测一下，如果浓度或是可溶性不合要求尽早弃掉，重新诱导以免影响实验。
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第1个回答 2023-07-23
在扩培时直接加入IPTG可能会导致一些问题。IPTG是一种诱导剂，可以诱导细菌表达外源蛋白，但它的加入需要在诱导阶段进行，而不是在扩培阶段。
在扩培时加入IPTG，可能会对菌体的生长速度产生影响，某些较敏感的蛋白有可能会形成包涵体，或是浓度有所变化。如果浓度或是可溶性不合要求，可能会影响实验结果。因此，建议在诱导阶段再加入IPTG，以确保蛋白表达的效率和稳定性。
在扩培时加入IPTG，可能会对菌体的生长速度产生影响，某些较敏感的蛋白有可能会形成包涵体，或是浓度有所变化。如果浓度或是可溶性不合要求，可能会影响实验结果。因此，建议在诱导阶段再加入IPTG，以确保蛋白表达的效率和稳定性。
