植物抗病基因中的抗病基因克隆是什么？

克隆基因有正向遗传学途径和反向遗传学途径。正向遗传学途径由被克隆基因的产物或表现型突变着手进行，而反向遗传学途径是根据特定核苷酸序列或其在基因组中的位置来实现克隆。现在还不了解大多数抗病基因的产物及其调控机制，植物抗病突变体也难以建立，由于这些原因，已获得的抗病基因，都是用反向遗传学途径克隆的。

用反向遗传学途径克隆抗病基因，应用最多的有两种技术，即转座子标记法和图位克隆法。

利用转座子标记法时，目的基因最好是显性单基因，其表型特征明显，得以准确快速地筛选到抗病突变体。目的基因还应相当稳定，以免转座子插入突变体被自发突变体所掩盖。所选用的转座子应有足够高的转座效率，转座子插入位点的随机性、插入突变频率过低、转座行为异常以及突变体选择系统不完善等，都会限制该法的应用。

图位克隆法，又称定位克隆法或作图克隆法，是首先由剑桥大学的AlanCoulson（1986）提出的。该法根据目标基因在染色体上的位置进行克隆，无需预先知道基因的DNA顺序和表达产物的有关信息。但需预先建立具有目标基因的适宜遗传分离群体，如杂交子代群体、回交子代群体、DH群体、RI群体等。使用图位克隆法要开展以下几项工作：①首先找到与目标基因紧密连锁的分子标记；②用遗传作图或物理作图，将目标基因定位在染色体的特定位置上；③建立含有大片段的基因组文库；④以目标基因连锁的分子标记为探针，筛选基因组文库；⑤用获得的阳性克隆构建目的基因区域的跨叠群；⑥通过染色体步行、登陆或跳跃，获得含有目标基因的大片段克隆；⑦通过亚克隆获得含有目的基因的小片段克隆；⑧通过遗传转化和功能互补试验，验证所获得的基因，最终确定目标基因的碱基序列。