如何进行空白校正,以及怎样扣除空白?还有基线的作用是什么?具体操作步骤有些混乱,谢谢高人指点。。。。
实验分为开机预热,样品准备,样品预订,关机清理四个部分。
一、开机预热
1、打开仪器样品室盖板,拿出其中用于干燥的硅胶袋。确保样品室光路无物体阻挡。再关上样品室盖板。
2 、打开仪器右侧下部电源开关,仪器即进入自检程序。自检过程中不得打开样品室盖板。
3 、自检结束,再按仪器面板上的“F4”键,仪器即可切换至由电脑控制。
4 、启动电脑,点击软件UV Probe, 出现对话框后,点击下部的“Connect”按钮。
二、样品准备
1、样品以适当的溶剂溶解。注意:不能用氯仿!因其可导致比色皿散架!二氯甲烷亦应慎用。常用溶剂为水及醇类。
2、测样前确认比色皿是玻璃的还是石英的?因玻璃在紫外区有吸收,作紫外光谱扫描要用石英比色皿,一般其上部标上“S”或“Q”的标志。
三、样品测定
1、在软件界面选择windows按钮,下拉,选择Spectrum按钮,点击,即出现光谱测量界面。
2、将样品的溶剂分别倒入两个比色皿中,加至比色皿约2/3的高度,再盖上方形比色皿顶盖(以免溶剂挥发而影响测定结果)。手持比色皿粗糙面(毛面),用擦镜纸轻轻擦净比色皿光面。
3、将两个比色皿放入样品室的比色皿架中。其中一个为参比架,一个为样品架(默认为靠外侧的比色皿架)。
4、在Spectrum界面单击Baseline,选定波长为800~200 nm,启动基线校正操作。
5、Baseline操作结束,选择"Go To WL",在对话框中输入500 (nm)。点击确定。
6、再点击“Autozero”,以消除两个比色皿之间的误差。
7、拿出样品架的比色皿,加入待测样品至2/3高度。
8、点击“Start”。仪器即开始扫描光谱。
9、扫描结束,右侧窗口即可出现光谱图。一般要保持吸光度在0.1~1.0之间较为合适。如果样品太浓,稀释后再重新测定。调整横轴和纵轴到合适的范围。点击光谱图可查看相关的参数,如:吸收峰等。
10、点击“File”---“Save as”可保存当前的文件。
四、关机
1、测量完毕,将比色皿从样品池中取出。
2、 点击软件下部的按钮“Disconnect”,退出软件窗口。
3、 关闭仪器右下侧的电源开关。
4、将干燥用的硅胶袋放入样品室中。
5、在仪器登记本上记录。注意:在仪器使用过程中如有异常,应在登记本上详细说明情况,并报告主管老师。
五、清场
1 、用适当的溶剂洗净比色皿。
2、 带走废液、废纸等垃圾。
扩展资料
特点
UV-1800 成功实现了高精度和高可靠性测量的严格要求,可满足各种应用的要求,可用在生物研究、生物工业、药物分析、制药、教学研究、环保、食品卫生、临床检验、卫生防疫等领域。
宽广的波长范围,可满足各个领域对波长范围的要求。4nm、2nm、1nm、0.5nm、0.2nm、0.1nm六种光谱带宽可根据用户要求定制安装,满足药典的严格要求。
全自动的设计理念,实现了最简单的测量手段。规模集成电路的设计大大提高了系统的扩展性和可靠性。改良优化的光路设计、进口光源和接收器造就了系统高性能和高可靠性。
丰富的测量方法,具有波长扫描、时间扫描、多波长测定、多阶导数测定(选)、双波长、三波长(选)DNA蛋白质测量(选)等多种测量方法,可满足 不同测量的要求,并可在6英寸大屏幕上直接显示。
根据用户的要求可选配单孔架、手动四连架、手动八连架、自动八连架、玻璃支架、试管架、1cm比色架、5cm比色架、10cm比色架等。
参考资料来源:百度百科-UV-1800双光束紫外可见分光光度计
UV1800系列的具体操作步骤如下:
1、接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时,需选用较高档。根据所需波长转动波长选择钮。
2、将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向t=0处。
3、盖上暗箱盖,调节“100”调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。
4、比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。
5、基线的作用如下:使用样品溶剂为样品进行波长扫描,得到的扫描曲线为基线,不同溶剂、不同时间基线可能不同,因此需要对基线进行校正,校正后的基线称为校正基线,只有在校正基线后测定的扫描图谱波长的位置才准确。
扩展资料:
UV-1800成功实现了高精度和高可靠性测量的严格要求,可满足各种应用的要求,可用在生物研究、生物工业、药物分析、制药、教学研究、环保、食品卫生、临床检验、卫生防疫等领域。
全自动的,实现了最简单的测量手段。规模集成电路的设计大大提高了系统的扩展性和可靠性。改良优化的光路设计、进口光源和接收器造就了系统高性能和高可靠性。
参考资料来源:
本回答被网友采纳1. 打开仪器样品室盖板,拿出其中用于干燥的硅胶袋。确保样品室光路无物体阻挡。再关上样品室盖板。
2 打开仪器右侧下部电源开关,仪器即进入自检程序。自检过程中不得打开样品室盖板。
3 自检结束,再按仪器面板上的“F4”键,仪器即可切换至由电脑控制。
4 启动电脑,点击软件UV Probe, 出现对话框后,点击下部的“Connect”按钮。
二、样品准备
1样品以适当的溶剂溶解。注意:不能用氯仿!因其可导致比色皿散架!二氯甲烷亦应慎用。常用溶剂为水及醇类。
2测样前确认比色皿是玻璃的还是石英的?因玻璃在紫外区有吸收,作紫外光谱扫描要用石英比色皿,一般其上部标上“S”或“Q”的标志。
三、样品测定
1. 在软件界面选择windows按钮,下拉,选择Spectrum按钮,点击,即出现光谱测量界面。
2. 将样品的溶剂分别倒入两个比色皿中,加至比色皿约2/3的高度,再盖上方形比色皿顶盖(以免溶剂挥发而影响测定结果)。手持比色皿粗糙面(毛面),用擦镜纸轻轻擦净比色皿光面。
3 将两个比色皿放入样品室的比色皿架中。其中一个为参比架,一个为样品架(默认为靠外侧的比色皿架)。
4 在Spectrum界面单击Baseline,选定波长为800~200 nm,启动基线校正操作。
5Baseline操作结束,选择"Go To WL",在对话框中输入500 (nm)。点击确定。
6 再点击“Autozero”,以消除两个比色皿之间的误差。
7 拿出样品架的比色皿,加入待测样品至2/3高度。
8 点击“Start”。仪器即开始扫描光谱。
9 扫描结束,右侧窗口即可出现光谱图。一般要保持吸光度在0.1~1.0之间较为合适。如果样品太浓,稀释后再重新测定。调整横轴和纵轴到合适的范围。点击光谱图可查看相关的参数,如:吸收峰等。
10 点击“File”---“Save as”可保存当前的文件。
此处只介绍紫外光谱的测定方法。其它测量(如:光度定量测量、动力学等)详见说明书。
四、关机
1测量完毕,将比色皿从样品池中取出。
2 点击软件下部的按钮“Disconnect”,退出软件窗口。
3 关闭仪器右下侧的电源开关。
4将干燥用的硅胶袋放入样品室中。
5在仪器登记本上记录。注意:在仪器使用过程中如有异常,应在登记本上详细说明情况,并报告主管老师。
五、清场
1 用适当的溶剂洗净比色皿。
2 带走废液、废纸等垃圾。