如题所述
gst-pulldown有杂带可以在平衡缓冲液里加一些盐。可以在平衡缓冲液里加一些盐,0点2至0点5MNaCl,这样可降低一些因离子作用带来的非特异吸附。同时在平衡液里加百分之零点五吐温等表面活性剂,可以改善。此外也可以用阶段洗脱的方法,用5毫米和10毫米还原谷胱甘肽去分别去洗脱,两者会有区别。还要注意的问题是超声破碎时注意功率和时间,避免过强时间过长,降解蛋白。可以GST抗体做WB看是降解或造成这样的结果。可以加点酶的抑制剂。
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