如何选择无细胞蛋白表达系统

如题所述

蛋白表达系统多了去了,大致可以分为三类:1)原核表达系统:大肠杆菌;芽孢杆菌;链霉菌等。2)真核表达系统:昆虫;酵母;哺乳动物细胞(如CHO, 293细胞)等。3)体外无细胞蛋白表达系统(又可以分为原核的和真核的),天根,promega都有相应的试剂盒可选。原核的主要是指大肠杆菌表达系统了,优点就四个字,简单快捷,缺点也是蛮明显的:容易形成包涵体;折叠性差;很少的翻译后修饰;表达出来的蛋白可能没有活性。所以如果蛋白主要是用来做活性实验,建议还是用真核表达系统。如果是用来验证抗体,或者做为抗原,那么就无所谓了。真核的,优点就是表达出来的蛋白都是可溶的,一般都有活性,各种修饰完备;缺点就是贵,主要是培养基贵。不同的蛋白适合不同的真核表达系统,让有经验的分析下就可以。比如。我以前做过一个细胞因子,CXCL17,在原核中弄不出可溶的来,后来找了纽普生物他们分析了下,给我用的昆虫表达系统做出来的。他们还告诉我,如果是蛋白激酶的话,不建议使用昆虫表达系统。希望对你有帮助
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