急用,好的话还有加分
从含GFP基因的载体上酶切下GFP基因,比如pGFP载体,切胶回收GFP基因片段,再同样酶切你的表达载体(根据你想表达的物种选择不同载体),把回收的GFP基因同你酶切后纯化的表达载体放到一起,加T4连接酶连接过夜。再转化大肠杆菌。如果只是在大肠杆菌里做原核表达,就直接转化蛋白表达能力强的大肠杆菌菌株,比如BL21。如果是想在植物细胞或动物细胞里表达,利用菌落PCR筛选出真阳性菌株,再扩培阳性菌株,抽提质粒。植物的话,一般是再转到农杆菌里,利用农杆菌转染植株,使得GFP插入植株染色体,表达GFP蛋白。动物的话,一般是利用病毒载体,直接转染细胞。追问
已经解决了,不过还是谢谢你。
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