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为什么真核载体不表达
为什么
构建的
真核表达载体
在真核细胞中
不表达
答:
所以说构建的
真核表达载体
高表达mRNA却检测不到目的蛋白是完全有可能的。
为什么真核表达载体不
能在原核中表达?
答:
真核基因有内含子,基因不连续
。原核细胞基因没有内含子,基因是连续的。所以真核载体要想在真核细胞中表达就必须有内含子
真核表达
不出来
答:
信号肽的问题。在构建完成后,其所携带的信号肽仅在
真核表达
体系中有少量的表达。通过对信号肽链的修饰,可以使其直接表达,从而大大提高其表达量。因此,可以在不检测靶蛋白的情况下,构建高表达的基因
载体
。真核即真核生物是所有单细胞或多细胞的、其细胞具有细胞核的生物的总称,它包括所有动物、植物...
真核表达载体
转染293,序列都正确,
不表达
是
什么
原因
答:
①不表达,从基因上开始分析,无论是用那种宿主表达蛋白,真核表达或是原核表达,
都要考虑到基因优化的层面
,如果基因本身不适在此系统中表达,那么下游在怎么优化也是不表达的 ②表达条件的优化,转染效率是否转染成功,细胞培养细胞生长的状态,这些条件是可以通过自己优化解决的 此外,真核细胞蛋白表达,...
为什么
E.Coli表达不宜
表达真核
基因组DNA
答:
绝大多数真核表达载体是不能在大肠杆菌中表达的 真核表达载体和原核载体是不一样的
,
涉及到一些修饰的地方原核是没有的
。不过生化实验无绝对的事情,也许有的时候用真核表达载体去做原核表达也有可能会有一点表达。但应该不会出现很高的表达量。所以说绝大多数真核表达载体是不能在大肠杆菌中表达的。最...
...
真核表达
质粒,测序后序列是正确但的,但就是
不表达
。表达蛋白抗体和标...
答:
你再多挑些斑试试,
真核
质粒
不表达
,很多时候是因为转染效率太低。我们这有挑了将近100个才找到表达的
一
真核
基因在大肠杆菌中未得到活性
表达
,原因是
什么
答:
没有
表达
目的蛋白还是表达了没有活性啊?没有表达 1 检查你构建的
载体
是否有问题,比如移码;2 检查诱导物加对没有?3 尝试低温长时间诱导;4 有时表达较弱,且和别的带重合,不好判断,可以做个Western blot 看看;表达了而没活性:1 形成包涵体;2 缺少
真核
修饰体系;...
真核
生物中分离到的完整的基因片段与
表达载体
构成的重组质粒转化入大肠...
答:
大肠杆菌为原核生物,原核生物的基因序列中不含有内含子,也就没有内含子的剪切机制,而
真核
生物中获得的完整的基因片段中一定是含有内含子的,(mRNA中不含)所以,在
表达
上会有差异。
真核
生物DNA
为什么
无法在原核生物中
表达
出具有活性的蛋白质产物?这是一...
答:
而原核生物基因中没有内含子和外显子之分,所有基因部分
表达
了折叠即可形成有活性的蛋白质,即使
真核
生物的基因在原核生物中表达,也没法剪切,也就无法形成有活性的蛋白质。所以说人的胰岛素不能在原核生物种合成,含有糖侧链的蛋白质也不能在原核生物中表达活性。基因不处理是不行的。
基因工程问题,
真核
基因在原核细胞中如何
表达
答:
一、在基因工程中,内含子的存在可能会干扰
真核
基因在原核细胞中的表达。为了克服这一问题,可以移除基因中的内含子,并通过将基因的编码序列(cDNA)连接到
表达载体
中来实现。二、为了确保真核基因在原核细胞中有效表达,选择的表达载体应含有宿主菌能够识别并使用的原核启动子。市售的表达载体通常已经包含...
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