一般的话,原因答题是可以分为两种:
①不表达,从基因上开始分析,无论是用那种宿主表达蛋白,真核表达或是原核表达,都要考虑到基因优化的层面,如果基因本身不适在此系统中表达,那么下游在怎么优化也是不表达的
②表达条件的优化,转染效率是否转染成功,
细胞培养细胞生长的状态,这些条件是可以通过自己优化解决的
此外,
真核细胞蛋白表达,载体的选择是很重要的,因为利用哺乳动物细胞表达蛋白,你是用的是瞬时转染表达技术,瞬转效率本身也不高,1mg的质粒摇1l也就能得到1mg左右的蛋白,所以载体的选择很关键。