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原核生物基因表达调控的步骤
基因原核表达的
详细
过程
答:
【方法】 酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患者腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出resistin
基因
cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和
原核表达
载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体通过T4DNA连接酶进行定向连接,用核酸内切酶EcoRI、KpnI酶切和测序方法鉴定出重组表...
简述
原核生物基因表达调控
模式及其分子机制?
答:
通常有两种方式:①起始调控,即启动子调控;②终止调控,即衰减子调控
。原核基因组的调控机制:通过负调控和正调控因子所进行的复合调控,阻遏蛋白与操纵基因结合,妨碍RNApol与P结合形成开放性启动子复合物,阻止基因转录;当阻遏蛋白与操纵子基因解离时,RNA聚合酶与启动子结合,起始基因转录,①转录起始...
论述
原核生物
与真
核生物基因表达调控的
异同。
答:
真核生物的调节分转录前调节、转录水平调节和转录后水平调节
。转录前调节包括染色质丢失、基因扩增、基因重排、染色体DNA的修饰和异染色质化。而转录水平的调节主要是在转录活性的调节上,包括染色质活化、沉默子和增强子调控转录活性和反式作用因子的调控。转录水平上的调控包括在新生的mRNA前体的5'加上“...
如何使
基因
在
原核生物
中
表达
答:
1.获取目的基因:最简单的是直接从cDNA文库找,不然就要自己用mRNA逆转录出cDNA,然后PCR,电泳检测,回收
。2.酶切和连接:找一个质粒载体,根据载体的说明书选择内切酶,一般是双酶切。把载体和你的目的片段用一样的酶切了,然后混合了连接。3、转化:找一种工程菌,把它弄成感受态,把你连接好了...
原核生物基因表达过程
答:
复制:基因在解旋酶作用下解旋并以解旋后的两条链为模版以游离脱氧核糖核酸为原料
,在DNA聚合酶作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA子链。转录:基因在解旋酶作用下解旋。RNA聚合酶与原核基因编码区上游RNA聚合酶结合位点结合,在其作用下游离核糖核苷酸与原核基因模版链根据碱基互补配对原则编码并聚合成...
原核生物
是如何进行
基因表达的
?
答:
4. 魔斑:当细菌生长
过程
中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生一个应急反应,停止全部
基因的表达
。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级
调控
子或称为魔斑。 5. 上游启动子元件:是...
原核生物基因表达的调控
主要发生在什么
过程
中
答:
原核生物基因表达调控
主要发生在(转录)
过程
中。
阐述
原核生物基因表达调控
途径
答:
转录水平调控:1.操纵子的转录调控;2.分解代谢物阻遏调控;3.细菌的应急反应;4.通过σ因子更换的调控;5.信号转导和二组分调节系统;6.噬菌体溶源化和裂解途径的转录调控。转录后调控:1.翻译起始调控;2.mRNA的稳定性;3.稀有密码子和重叠
基因调控
;4.反义RNA调控;5.翻译的阻遏调控;6.ppGpp...
基因表达的调控
主要包括那几个方面?
答:
DNA和染色体水平:
基因
丢失、基因修饰、基因重排、基因扩增、染色体结构变化。转录水平
调控
:转录起始、延伸、终止均有影响。
原核生物
借助于操纵子,真核生物通过顺式作用元件和反式作用因子相互作用进行调控。转录后水平调控:真核生物原初转录产物经过加工成为成熟的mRNA,包括加帽、加尾、甲基化修饰等。
原核细胞
和真核细胞
基因表达过程
的比较
答:
1.原核基因转录调节特点 ⑴σ因子识别特异启动序列,不同的σ因子决定特异
基因的
转录激活,决定mRNA,rRNA和tRNA基因的转录.⑵除个别基因外,
原核生物
绝大多数基因按功能相关性成簇的串联、密集于染色体上,共同组成一个转录单位——操纵子.一个操纵子只含一个启动序列及数个可转录的编码基因.2.真核细胞结构...
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