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原核蛋白表达小摇
原核表达
大
摇摇
菌时间
答:
12到16小时
。原核表达大摇摇菌的时间要求一般不是很严格,通常12-16小时,摇菌还分为大摇和小摇,大摇时间为16个小时,小摇时间为12个小时。
关于
原核表达
问题
答:
OD600只能看出菌体浓度,一般超过1.0才够,我们的经验是500ml的菌液在锥形瓶里摇到发白,手掌放在瓶底下从上面看不清手指了,就OK了,但关键还是要看你的目的蛋白浓度,条带会变成很明显的一大团。诱导的起始浓度是要测定的,一般都是1.0,诱导时间是取样以后根据诱导
蛋白表达
情况测定的,没有统一安...
原核表达蛋白
1l菌液加多少lysis buffer
答:
BL21是比较基础的宿主,转化后摇菌到对数,加20%的甘油,放在-20度可以保存半年,-80度可以多保存几个月。放时间长了都不太好,建议三五个月复苏一次。
蛋白
是包涵体形式,主要还是和蛋白的性质有关,虽然还有几种在BL21基础上改造的宿主,但是效果还要因你蛋白的性质而异。建议换换其他
表达
载体,优化...
基因
原核表达
的详细过程
答:
RT-PCR法扩增出resistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和
原核表达
载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体通过T4DNA连接酶进行定向连接,用核酸内切酶EcoRI、KpnI酶切和测序方法鉴定出重组表达质粒。
原核表达
菌液的OD值过高再去诱导
蛋白
可以吗
答:
一般情况下 OD值在0.5~0.8都可以诱导,其实1也可以 但是超过1最好还是别诱导了。。。
原核表达
菌液的OD值过高再去诱导
蛋白
可以吗
答:
一般都是在对数生长期进行诱导
表达
。OD值过高,细菌可能已经老化,诱导也表达量较少甚至不表达
植物基因中的大肠杆菌
原核表达
方法谁知道?生物医学工程方面的信息哪里...
答:
以pET-32a(+)为例,介绍将目的基因克隆进载体并进行表达获得重组
蛋白
的过程,从而熟悉根据自己的要求采用不同的载体进行
原核表达
的全过程。1.准备工作(试剂配置和器材准备)1)操作流程示意图主要步骤操作①制备pET-32a(+)载体 用限制性酶消化,去磷酸化后胶纯化回收②制备插入DNA PCR装入质粒后进行限制性...
高中生物知识点总结
答:
胞吞、胞吐:如载体蛋白等大分子★37、细胞膜和其他生物膜都是选择透过性膜,这种膜可以让水分子自由通过,一些离子和小分子也可以通过,而其他离子,小分子和大分子则不能通过。38、 本质:活细胞产生的有机物,绝大多数为
蛋白质
,少数为RNA 高效性:酶在降低反应的活化能方面比无机催化剂更显著, 因而催化效率更高特性...
甲基绿吡罗红混合染色剂能够将
原核
细胞的拟核染成红色吗
答:
B
高一生物必修一第二章知识点总结
答:
二、组成细胞的化合物:组成细胞的化合物分为无机化合物和有机化合物,前者中水的含量是最多的,后者中含量最多的是
蛋白质
。三、细胞中的无机物:(一)细胞中的水:1、存在形式:自由水和结合水。2、含量:在构成细胞的各种化合物中,水的含量最多。(1)不同的生物体内水的含量差别很大;(2)同一生物体不同的生长...
1
2
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