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大肠杆菌表达载体的类型
如何以
大肠杆菌
质粒DNA为
载体
克隆一个编码蛋白的基因,并使之在大肠杆菌...
答:
一般程序如下: 获得目的基因-准备
表达载体
-将目的基因插入表达载体中 (测序验证)-转化表达宿主菌-诱导靶蛋白的表达-表达蛋白的分析-扩增、 纯化、进一步检测。 [主要试剂 主要试剂] 主要试剂 1、LB 培养基。 2、 100mM IPTG (异丙基硫代-β-D-半乳糖苷) 2.38g IPTG 溶于100ml ddH2O ...
基因载体与基因
表达载体的
区别?
答:
一、构成不同 基因表达载体:构成包括启动子、终止子、标记基因、目的基因。重组质粒:构成包括目的基因片段、质粒、酶。二、对象不同 基因表达载体:基因
表达载体的
对象通常是活细胞。重组质粒:重组质粒的对象通常是细菌。三、原理不同 基因表达载体:将不同来源的基因在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞...
求详细的基因
表达载体的
组成,要详细啊~···
答:
完整的
表达载体
必须包括:1、复制子,在细菌中扩增时所必须。2、启动子,目的基因在细菌或细胞中转录所必须,转录了才能翻译,是谓“表达”。3、原核筛选标记,细菌增菌所必须。4、真核筛选标记,如果是真核表达,就是必须的。5、多克隆位点,即酶切位点,插入目的片段的区域。6、其他所需构件,可视...
pET-his
载体
为什么必须在BL21(DE3)菌,而不能在DH5α中
表达
?
答:
噬菌体的DE3片段,该片段中包含了编码T7RNA聚合酶的基因,能够在IPTG或乳糖诱导下表达T7RNA聚合酶,而该聚合酶又能进一步转录T7启动子,从而启动载体上外源基因的表达。因此说,理论上只要整合了DE3片段的
大肠杆菌
(比如BL21(DE3)或JM109(DE3)等)都能用作pET系列
载体的表达
。
原核表达载体和真核
表达载体的
区别
答:
二、表达实现方式不同:原核
表达载体
测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。真核表达载体具有neo基因,可以采用G418来筛选已成功转染了该
载体的
靶细胞。这些特殊的结构可以实现目的基因...
大肠杆菌
是水生生物还是陆生生物?
答:
【主要特点】大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌,周身鞭毛,能运动,无芽孢。主要生活在大肠内。1、大肠杆菌是细菌,属于原核生物;具有由肽聚糖组成的细胞壁,只含有核糖体简单的细胞器,没有细胞核有拟核;细胞质中的质粒常用作基因工程中的运
载体
。2.
大肠杆菌的
代谢
类型
是异养兼...
大肠杆菌
是什么,可以作为运
载体
吗
答:
大肠杆菌
是一种原核细菌 通常在基因工程中不是作为运载体出现 而是作为靶细胞 因为大肠杆菌不具备运
载体的
条件 即能够在宿主细胞内保持目的基因稳定存在 并将目的基因整合到宿主细胞的DNA上获取
表达
大肠杆菌并不是寄生在细胞内的 因此也就不存在宿主细胞一说 更不能运载传递目的基因了 ...
...采用E.coli表达有用的蛋白质必须使构建的
表达载体
具备哪些主要条件...
答:
【答案】:运用E.coli表达有用的蛋白质必须使构建的
表达载体
具备下列主要条件:①含
大肠杆菌
适宜的选择标志;②具有能调控转录、产生大量mRNA的强启动子,如lac、tac启动子或其他启动子序列;③含适当的翻译控制序列,如核蛋白体结合位点和翻译起始点等;④含有合理设计的多接头克隆位点,以确保目的基因按...
求助:分子生物学考博试题:在
大肠杆菌
中
表达
动物激素的基因可能遇到的问...
答:
现在,这个合成基因可被插入
载体
中。③有时加工过程可以在离体条件下进行。如果加工有困难,可以用合成基因,从而免除加工过程。④选用合适的突变型宿主从而防止蛋白酶水解。如果用酵母作为宿主上述许多问题都可以较容易地解决,尤其是现在有既能在
大肠杆菌
中又能在酵母中复制的穿梭质粒载体。说明:1)ATG,TAG...
真核过
表达
质粒,原核过表达质粒的区别~急求~~
答:
一、指代不同 1、真核过表达质粒:真核细胞
表达载体
之一为pEGFP-N1载体,具有对方面的优点。pEGFP-N1载体上携带有EGFP蛋白表达基因。2、原核过表达质粒:能携带插入的外源核酸序列进入原核细胞中进行
表达的
载体。二、特性不同 1、真核过表达质粒:该质粒具有很强的复制能力,可以满足随宿主细胞分裂时...
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