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16度原核表达
原核表达16度
诱导多久合适
答:
12到48小时。
原核表达
系统是表达外源基因的一种方法,在
16
摄氏度下进行诱导的时间控制在12到48小时范围内,可以使得蛋白缓慢合成,有利于蛋白的正确折叠,从而形成可溶性蛋白。
原核表达
在
16度
应诱导多长时间
答:
低温诱导一般需要的时间都比较长,一般如果能够诱导出来的话大概是24小时。如果是PET系统的话,有些蛋白是
16度
诱导不出来的,你得自己重新摸一下诱导的温度。
IPTG诱导BL(DE3)/BL(DE3)plysS蛋白
表达
的最佳温度,时间,IPTG的浓度...
答:
一般是将菌摇到OD600=0.4-0.6,然后加入终浓度1mM的IPTG(这个一般不变,诱导不出来再考虑适当多加点,例如2-5mM),但是诱导时间和诱导温度根据诱导蛋白大小、性质的不同而不同,需要摸索的,你可以做个预实验,隔两个小时取样,最后SDS-PAGE,寻找合适诱导时间,如果不想这么麻烦,直接过夜诱导。诱...
基因
原核表达
的详细过程
答:
【方法】 酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患者腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出resistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和
原核表达
载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体通过T4DNA连接酶进行定向连接,用核酸内切酶EcoRI、KpnI酶切和测序方法鉴定出重组表...
原核
系统中影响外源基因
表达
效率的主要因素?
答:
如果外源基因是来自于
原核
生物,由于
表达
机制的差异,这些基因在植物体内往往表达水平很低,例如,来自于苏云金芽孢杆菌的野生型杀虫蛋白基因在植物中的表达量非常低,研究发现这是由于原核基因与植物基因的差异造成了mRNA稳定性下降。美国Monsanto公司Perlak等人在不改变毒蛋白氨基酸序列的前提下,对杀虫蛋白基因进行了改造,选用...
原核
启动子有哪四大要素?
答:
原核
基因转录起始位点通常是嘌呤,其序列为CAT(A为起始位点)。-10区是一个6碱基保守序列(常以-10为中心)。T80A95t45A60A50T96,有助于DNA的解链。-35区是另一个6碱基保守序列(常以-35为中心)。T82T84G78A65C54a45研究表明,当-10区和-35区中心位置相距
16
-18bp时,该启动子的功能较强;...
H1N1亚型猪流感病毒中的H1N1是什么意思?亚型是怎么划分的?
答:
1)利用
原核表达
系统(大肠杆菌系统)或真核表达系统(酵母系统)在体外表达猪流感病毒流行毒株的HA基因和NA基因,然后收获、浓缩和纯化目的蛋白,再进一步制苗免疫。这种方法的优点是制备过程简单、目的蛋白产量大、主要成分可以定量配置。但由于体外表达的蛋白难以维持或恢复天然蛋白的空间结构,蛋白纯化过程复杂、成本高,而且总...
王群的学术论著
答:
王群. 重叠综合征患者免疫球蛋白、补体C3C4和肌酶的相关研究. 广东医学. 2008,29(10)6.Qun Wang. ZG Bi. and YS Wan. Molecular cloning and expression ofE6 and E7 genes of human papillomavirus type 6b. J Investigative Dermatology. 2006,126(4):A127-7.王 群,韩永智.口服特比奈芬...
植物基因中的大肠杆菌
原核表达
方法谁知道?生物医学工程方面的信息哪里...
答:
当需要表达蛋白时,在细菌培养基中加入IPTG来启动表达。不同载体在邻近克隆位点处具有编码不同的多肽“标签”的序列,在定位、检测或纯化目的蛋白时提供方便。以pET-32a(+)为例,介绍将目的基因克隆进载体并进行表达获得重组蛋白的过程,从而熟悉根据自己的要求采用不同的载体进行
原核表达
的全过程。1.准备...
白俊杰的部分发表的研究论文
答:
(1) 14 郑清梅 , 叶星 , 白俊杰 , 吴锐全 , 劳海华 , 罗建仁,斑节对虾溶菌酶基因的
原核表达
与产物活性检测 , 水产学报 2005 29(1) 20-24 15 杜诚,卢迈新,叶星,劳海华,黄樟翰,白俊杰,五个罗非鱼群体的遗传分析与分子标记, 大连水产学院学报 2004 19 ( 3 )
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郑清梅 , 叶星 , 白俊杰 , 吴锐...
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