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pgex原核表达
pgex
-4t-1
原核表达
存在葡萄糖效应吗
答:
又称葡萄糖阻遏或分解代谢产生阻遏作用。葡萄糖或某些容易利用的碳源,其分解代谢产物阻遏某些诱导酶体系编码的基因转录的现象。如大肠埃希氏菌培养在含葡萄糖和乳糖的培养基上,在葡萄糖没有被利用完之前,乳糖操纵子就一直被阻遏,乳糖不能被利用,这是因为葡萄糖的分解物引起细胞内cAMP含量降低,启动子不...
蛋白
表达
--
原核
蛋白表达
答:
挑战与优化,如提高蛋白的可溶性表达,可通过pCold、pBAD、
pGEX
等载体,辅以弱启动子,巧妙地调整表达条件。若追求分泌型蛋白,可以利用编码原核蛋白信号肽的载体,如pET20/22,引导蛋白走向细胞外世界。优化培养条件,如调整温度、营养成分,甚至引入辅助物质,是降低包涵体形成的关键。同时,
原核表达
问题的...
蛋白
原核表达
答:
原核表达
的核心其实用到的是分子生物学中我们学过的乳糖操纵子模型。乳糖操纵子模型主要有负调控和正调控,这里主要用的是负调控的机制。我们使用IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)做为诱导剂。在没有乳糖存在时,lac操纵子处于阻遏状态。I序列在PI启动序列操纵下表达的Lac阻遏蛋白与O序列结合,抑制转录启动。当...
PGEX
系列
表达
载体的特点
答:
pgex
特点就是带有GST标签,可以增加目的蛋白的溶解度,别的没什么特点,属于大众型载体,目前也较常使用。你说的没有
表达
有没有做全菌的sds-page啊,不管是不是形成包涵体全菌电泳都应该有条带,至于形不形成包涵体就取决于你的iptg浓度和诱导温度了,iptg越低,温度越低可溶性越好,我们曾做过0.1的i...
4T-1 载体GST在基因的上游还是下游
答:
pGEX
-4T-1载体是一种常用的
原核表达
载体,具有Amp抗性,质粒大小为4.9 kb。该载体多克隆位点区域含有多个常用的内切酶位点序列,便于不同基因的克隆;且全序列中含有tac启动子、GST标签序列,GST标签位于融合基因的N端,是一种高效的蛋白表达载体。Tac启动子在没有诱导物存在的情况下,质粒上携带的lacIq...
质粒pEGX-6P-1的测序引物是什么/
答:
是
原核表达
载体
pGEX
-6p-1吧。pGEX系列的测序引物都是一样的,一般的测序公司有通用的pGEX-F/R 双向测序引物。pGEX-F:GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG pGEX-R:CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG
用
原核
载体克隆并
表达
一种生物中的某个基因(序列已知),这种生物若是一...
答:
大肠就不一样,随便搞。克隆质粒非常非常多,一般选实验室有的,或容易得到的。
表达
载体也很多,pET系列,
pGEX
系列,pCold系列等;表达菌也很多,一般BL21系列就足够了,当然有特殊要求的可以在试试其他菌。好了,我说一下我的步骤。首先不管是真核还是
原核
的靶基因,只要对表达菌没有太大损伤,都能...
目前进行的基因工程操作多用什么做运载体
答:
质粒是基因工程最常用的运载体,它广泛地存在于细菌中,是细菌染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子,大小只有普通细菌染色体DNA的百分之一。质粒能够“友好”地“借居”在宿主细胞中。一般来说,质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性的作用。但是,质粒的复制则只能在宿主细胞内完成。大肠杆菌、枯草...
ps载体卡那抗性
答:
有真核的。如:pEGFP-N1(卡那抗性)、pCMV-myc(氨苄抗性)、pCDNA系列、pBUDCE4(博来霉素抗性)
原核表达
载体如:
pGEX
系列(pGEX-5X-3、pGEX-4T-1等。
常用的
原核表达
载体有哪些?
答:
pEGFP-Actin
表达
载体中含有绿色荧光蛋白和人胞浆β-肌动蛋白基因,在PCMV启动子驱动下,在真核细胞中高水平表达。载体骨架中的SV40 origin使该载体在任何
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