【整理】蛋白提取纯化,这一篇就够啦!答:有时候,蛋白浑浊可能是缓冲环境或还原剂使用不当,而His蛋白纯化未达预期,则需要调整超声功率、样品缓冲液或检查标签表达。Ni2+虽然常用,但并非唯一选择,Hitrap IMACHP可帮助筛选更适合的金属离子。在纯化处理上,务必注意清洗问题,如调整洗脱条件,去除大肠杆菌带和包涵体,硫酸铵沉淀是常用的预处理步骤。总的来说,蛋白...
蛋白过镍柱纯化的原理和步骤是什么答:Ni柱中的氯化镍可以与有HIs(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。步骤是:过柱子前可以选择Ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太慢,可以加个恒...