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pet28a空载体蛋白标签多大
pet28a载体
中连在目的
蛋白
前的
标签
和酶切位点有几KD?
答:
3kd左右
。 但是通常6*his带大量正电,使得跑SDS-PAGE时电泳行为异常。 所以这个3kd通过电泳是看不出来的。
pet28a
和pet30a
载体
的区别
答:
pet
30a质粒类型是大肠杆菌
蛋白
表达,表达水平较高,克隆方法是多克隆位点,限制性内切酶;载体大小是5422 bp。pet -
28a载体
shibiaodazaitima是表达载体,理论上影响是比较大的,原核lb培养不加抗生素的话,很容易出现丢失了带有外源基因质粒的生长速度比目的菌的生长速度快得多的情况。最后的结果就是影响目...
计算目的
蛋白
是
多大
,怎么算,还有什么
标签
的,那个要另外加吗
答:
从
标签
之前的启动子算起,直接算到pet-28a上的终止子为止。计算分子量的方法:三个碱基对应一个
蛋白质
,每个蛋白质的分子量平均为110Da。我认为你的目的蛋白的分子量很可能是380/3*0.11+3=17kD左右。式子中的3kD是
pet28a载体
上的MCS的大小,如果你自己没有加启动子和终止码,那么MCS就默认为是全...
pET28a载体
表达,我的融合
蛋白
分子量应该
多大
?计算公式是什么?_百度...
答:
加上前面的融合肽以及终止子之前翻译的一个肽段,最终表达的
蛋白
分子量是59KD左右
pET20b、pET22b和
pET28a
这3个质粒哪个能够承载外源基因并在EIB202迟钝...
答:
pET
系列的
载体
启动子我记得是T7噬菌体还是T4噬菌体的强启动子,在您做的爱德华氏菌中如果不能正常表达外源
蛋白
,建议:1.检查该菌是否是T噬菌体的宿主,如果不是,那么就应选择其他载体,或自行构建带有合适启动子的载体。2.检查转化是否成功,很多菌是非常难转进外源载体的。 以上。祝好运。
pet28a
的T7tag有必要吗
答:
还是有必要的,Origin:Theoriginofreplication,由复制起始位点和相关调控元件组成,
pET
-
28a
(+)中的复制子属于松弛型中低拷贝型复制子,目标
蛋白
的高表达会对宿主菌造成较大的压力,所以表达
载体
的拷贝数通常较低。Kan:编码氨基糖苷磷酸转移酶,使质粒产生卡那霉素抗性,用于筛选培养过程中含有目标质粒的...
pet
-32a
空载体
是可溶性表达吗
答:
该
空载体
紧紧会表达一段Trx
标签蛋白
,加上his标签,约20kd左右,是高度可溶的。
蛋白
原核表达
答:
使用
载体
以
pET
-28载体为例 Origin:由复制起始位点和相关调控元件组成,pET-
28a
(+)中的复制子属于松弛型中低拷贝型复制子,目标
蛋白
的高表达会对宿主菌造成较大的压力,所以表达载体的拷贝数通常较低。Kan:编码氨基糖苷磷酸转移酶,使质粒产生卡那霉素抗性,用于筛选培养过程中含有目标质粒的...
pET
30a
空载体 蛋白
多大
答:
什么都不插入的话,从NdeI内的ATG开始到C端6His之后的TAA一共225个碱基翻译成一段包含N端6His-tag,thrombin位点,S-tag,enterokinase位点在内(C端6His的读码框不对)的74个氨基酸。MHHHHHHSSGLVPRGSGMKETAAAKFERQHMDSPDLGTDDDDKAMADIGSEFELRRQACG RTRAPPPPPLRSGC- 大约……8KD吧!呃……另外...
载体pet28a
构建重组质粒,测序准确,转至BL21原核表达
蛋白
,,怎么也诱导...
答:
1 可能是太弱你看不出来,建议用His抗体做个western 看看是不是有条带而看不出。2 是不是融解性太差,建议将你的氨基酸序列做个疏水性分析。如果确实如此的话可能要重新构
载体
1
2
3
涓嬩竴椤
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28a诱导蛋白多大
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