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原核表达的意义
原核表达
为什么去除信号肽?
答:
你想用信号肽把蛋白
表达
到哪里呢?细胞没有核膜,缺少细胞器 通常做细胞内表达不需要信号肽的定位作用 多余的信号肽不能被细胞识别切除 有可能影响蛋白质的正确折叠 从而产生一系列问题
论述
原核
生物与真核生物基因
表达
调控的异同。
答:
【答案】:
原核
生物的基因组和染色体结构都比真核生物简单,转录和翻泽可在同一时间和位置上发生,因而基因
表达的
调节主要是在转录水平上。而真核生物由于存在细胞和结构的分化,转录和翻译过程在时间和空间上都彼此隔开,并且在转录和翻译后都有复杂的加工过程,因而基因表达在不同的水平上都需要调节。转...
原核
生物与真核生物基因
表达
调控有何不同?
答:
【答案】:转录水平操纵子调控模式是
原核
生物基因表达调控的主要方式,多细胞真核生物至今未发现操纵子,故其调控方式不同于原核生物。基因
表达的
时间性十分明显,而且是多水平的复杂的调控,其中以转录前和转录水平的调控较重要。转录前调控包括染色质及核小体结构的改变、基因扩增和重组等。转录水平的...
基因
原核表达的
详细过程
答:
构建人resistin基因
原核表达
载体并观察其表达,为开展对resistin的研究打下实验基础。【方法】 酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患者腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出resistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和原核表达载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体...
真核基因在
原核
细胞中
表达
需要解决哪些问题
答:
第一,克隆到
原核表达
系统中的序列必须是去掉内含子的cDNA序列.因为原核表达系统没有剪切修饰内含子的相关酶系统.第二,要用原核的启动子.检查一下真核基因密码子偏好是否存在原核表达系统的稀有密码子.那个稀有密码子的氨基酸会成为表达量的瓶颈.如果有,点突变之.第三,真核基因可能在表达过程中需要有分子...
原核
体系中
表达
真核基因的困难
答:
主要是
原核表达
体系的翻译后加工修饰修饰不完善(化学修饰:如乙酰化、甲基化、糖基化、泛素化……),无法赋予表达产物本来的活性;另外原核体系
表达的
蛋白常以包涵体的形式表达,纯化困难,另外蛋白经变性复性后可能会影响蛋白的生物学功能。其他的问题你再查查相关的书吧 ...
请问:真核生物的基因在
原核
生物基因进行
表达
时的注意事项 有哪些?_百度...
答:
2,所选的表达体系是否合适,有时,你需要表达的基因可能来源于真核生物的线粒体或叶绿体,其中是否有稀有密码子,否则会影响表达效率,表达的蛋白是可溶的还是包涵体,是否需要分泌型表达;3,
原核表达的
蛋白是没有糖基化修饰的,如果你的目的蛋白本身有糖基化,而且是后续研究必须的,就不适合用原核...
原核
生物大肠杆菌异源
表达
一定要切除信号肽吗?
答:
其次信号肽能否在宿主菌中能起作用(不同种类的细菌,信号肽有差异),信号肽能否被信号肽酶切除,很多情况下信号肽即使能起作用,一般也只能将
表达
产物分泌至细胞间质。但是如果信号肽没有除去,又不起作用,反而变成了负担。根据一些报道来自
原核的
信号肽在表达载体中起作用的可能性还是存在的。
目的蛋白有跨膜区,在
原核
中怎样克隆
表达
答:
实际上真核生物的蛋白也可以用真核细胞蛋白表达系统来实现,而且效果往往更好。用原核生物来表达主要还是因为操作简单,快速。如果希望表达和纯化的蛋白性质稳定,经原核系统表达之后仍然有正确的折叠构象,那么使用
原核表达
系统就很合适了。
原核
生物中
表达
真核蛋白应该注意什么问题
答:
基因需为cDNA,不能含有内含子,原核细胞不能对mRNA进行剪切;要分析DNA序列信息,分析其密码子,由于原核与真核生物的密码子偏好性不同,所以有时可能会出现稀有密码子而影响
表达的
情况;要注意你要表达蛋白的大小问题,一般情况下大于70KD的蛋白在原核菌种不容易表达或表大量低;
原核表达
出来的一般是...
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