如题所述
谈谈个人见解：
1，选对插入序列，克隆构建好后，测序，看你插入到原核载体中的序列是否正确、完整，有无移码和各种突变，起始密码子和终止密码是否正确；
2，所选的表达体系是否合适，有时，你需要表达的基因可能来源于真核生物的线粒体或叶绿体，其中是否有稀有密码子，否则会影响表达效率，表达的蛋白是可溶的还是包涵体，是否需要分泌型表达；
3，原核表达的蛋白是没有糖基化修饰的，如果你的目的蛋白本身有糖基化，而且是后续研究必须的，就不适合用原核表达；
4，既然是原核表达，大多是要纯化的，就要考虑你的纯化方案，以及选择合适的标签和标签的添加位置；
纯属个人见解，欢迎大家继续讨论和补充，祝愉快！
1，选对插入序列，克隆构建好后，测序，看你插入到原核载体中的序列是否正确、完整，有无移码和各种突变，起始密码子和终止密码是否正确；
2，所选的表达体系是否合适，有时，你需要表达的基因可能来源于真核生物的线粒体或叶绿体，其中是否有稀有密码子，否则会影响表达效率，表达的蛋白是可溶的还是包涵体，是否需要分泌型表达；
3，原核表达的蛋白是没有糖基化修饰的，如果你的目的蛋白本身有糖基化，而且是后续研究必须的，就不适合用原核表达；
4，既然是原核表达，大多是要纯化的，就要考虑你的纯化方案，以及选择合适的标签和标签的添加位置；
纯属个人见解，欢迎大家继续讨论和补充，祝愉快！
温馨提示：答案为网友推荐，仅供参考
第1个回答 2012-04-19
1 要用原核表达载体。
2 要用强启动子。
别的没啥
2 要用强启动子。
别的没啥
第2个回答 2012-04-19
你是问基金组构建吗？应该是内切酶最重要了，然后是温度、PH等理化条件。步骤好像是质粒选择、内切酶的选择、酶切、连接酶的连接、基因的表达了吧。
