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原核表达蛋白偏小
外膜
蛋白
和
原核表达
出来的蛋白是一样的吗
答:
外膜
蛋白
是膜外蛋白吗?还是膜蛋白的膜外部分。一般情况下涉及到膜蛋白,原核都很难表达出完全一致的,但是有些比较简单的蛋白,或者膜蛋白的胞外部分可以用
原核表达
,容易形成包涵体,要进行detergent的摸索才能提取出来。
原核蛋白表达
,总是在沉淀中,怎么解决
答:
应该是
原核表达
宿主菌比较准确 原核表达宿主菌之前可以
表达蛋白
,放一段时间不表达蛋白原因很多 首先要确认其他条件是否也有改变,比如其他基因,质粒载体,表达条件等等 原核表达宿主菌保存条件没有控制好可能导致宿主菌退化,被污染等等,结果就造成
蛋白表达
变少或者不表达。
真核
原核表达
系统的优缺点?
答:
知道小有建树答主 回答量:187 采纳率:0% 帮助的人:126万 我也去答题访问个人页 关注 展开全部
原核表达
系统表达调控方式组成型,诱导型表达产物定位分泌型,不分泌型(细胞内,细胞膜,周质空间)产物纯化方式是否融合
蛋白
,是否一步亲和纯化产物溶解状况可溶,包含体,分泌型 在各种表达系统中,最早被采用进行研...
试述
原核表达
体系和真核表达体系各自的优、缺点。
答:
【答案】:
原核表达
体系如E.coli是当前采用最多的原核表达体系,其优点是培养方法简单、迅速、经济而又适合大规模生产工艺。其不足之处是由于缺乏转录后加工机制,只能表达克隆的cDNA,不宜表达真核基因组DNA(即含有内含子的DNA);表达的真核
蛋白质
不能形成适当的折叠或进行糖基化修饰;表达的蛋白质常常...
求助:真核还是
原核表达
答:
真核表达则依赖于脂质体或PEI等转染试剂,实现瞬时表达,质粒会被降解,不能稳定扩增,适合研究基因功能而非
蛋白
纯化。真核表达在昆虫细胞的杆状病毒表面展示系统中也有应用,通过转染重组质粒并借助病毒感染,实现目的基因的表面表达。总结来说,真核和
原核表达
各有特点,真核表达更适用于基因功能研究,而...
原核表达
带有分泌信号肽的
蛋白
,是细胞内多还是细胞外多
答:
关键是这个信号肽
原核
细胞买不买单。一般认为,还是
原核
细胞胞内
表达
居多。如果有原核细胞毒性,表达量可能不高。
原核表达
后如何验证
蛋白质
是正确的呢
答:
1,如果
蛋白
是分泌
表达
,直接分离上清(传统的方法:离心去细胞和细胞碎片→过滤(0.45或0.22nm)→蛋白纯化(蛋白纯化是一个很复杂的过程,这里一笔带过了,电泳,层析,沉淀等方法)→获得目的蛋白 2,胞内蛋白,首先裂解细胞(这样细胞内的杂蛋白。
100KD 的
蛋白质
在大肠杆菌中好
表达
吗
答:
蛋白大小和表达强弱没有密切的关系(当然过大的
蛋白质原核表达
困难),要看你的蛋白的来源(原核还是真核来源、是否经过修饰等).不好表达.表达出来活性也很可能没有.大肠杆菌表达系统缺乏糖基化.
原核表达
目的
蛋白
不表达怎么办
答:
使用gene designer (DNA tool 2.0)非常经典 不过你的
蛋白
不
表达
,很可能是形成了包涵体,这个是一个非常大的问题,更换可溶性表达标签是一个方法 建议你去查一查文献
真核基因在
原核
细胞中
表达
需要解决哪些问题
答:
第二,要用原核的启动子.检查一下真核基因密码子偏好是否存在
原核表达
系统的稀有密码子.那个稀有密码子的氨基酸会成为表达量的瓶颈.如果有,点突变之.第三,真核基因可能在表达过程中需要有分子伴侣帮助折叠成正确的构象才会有活性.如果单独的
蛋白
没有活性,应该考虑是否需要同时克隆分子伴侣基因.第四,注意...
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