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原核表达蛋白偏小
相比真核表达系统,
原核表达
系统的劣势体现在
答:
一、
原核表达
体系 1、E.coli是当前采用最多的原核表达体系,其优点是培养方法简单、迅速、经济而又适合大规模生产工艺,其缺点为:由于缺乏转录后加工机制只能表达克隆cDNA,不宜表达真核基因组的DNA;由于缺乏适当的翻译后加工机制,表达产物无修饰过程,分子构型可发生改变。2、表达的
蛋白质
常常形成不溶性...
关于
原核表达
问题
答:
OD600只能看出菌体浓度,一般超过1.0才够,我们的经验是500ml的菌液在锥形瓶里摇到发白,手掌放在瓶底下从上面看不清手指了,就OK了,但关键还是要看你的目的蛋白浓度,条带会变成很明显的一大团。诱导的起始浓度是要测定的,一般都是1.0,诱导时间是取样以后根据诱导
蛋白表达
情况测定的,没有统一...
如何提高外源基因片段在
原核
细胞中的
表达
量
答:
在表达过程中,注意摸索诱导剂IPTG的量、诱导时间及培养温度。多次摸索就可以找到一个最佳方案,因为
蛋白表达
是一个载体+宿主菌+培养条件的优化组合的选取。你有可能还要考虑蛋白是否会形成包涵体,用什么样的柱子纯化。本人觉得主要是在诱导和温度培养是影响比较大,多设几组对照看哪一组表达量高。祝你...
原核
生物的
表达
系统和真核的有什么不同
答:
3、真核生物有内质网、高尔基体、溶酶体、液泡等细胞器,
原核
生物没有。4、真核生物中除某些低等类群(如甲藻等)的细胞以外,染色体上都有5种或4种组
蛋白
与DNA结合,形成核小体 ;而在原核生物则无。5、真核细胞在细胞周期中有专门的DNA复制期(S期);原核细胞则没有,其DNA复制常是连续进行...
原核表达
未诱导与诱导差别不大什么原因
答:
蛋白
直接没有诱导出来。导结果差别不大的话,是蛋白直接没有诱导出来,换个载体重新构建质粒导入新的感受态细胞试着再诱导一下看看。广义的
原核表达
,是指发生在原核生物内的基因表达。狭义的原核表达,常出现于生物工程中。是指通过基因克隆技术,将外源目的基因,通过构建表达载体并导入表达菌株的方法,使...
我做
原核表达
,PET32a连入目的基因用的是BamHI和SalI两个位点,请问表达...
答:
这说明你的目的
蛋白
没有
表达
,因为PET32a空载表达的蛋白就有20KD左右,当然诱导时间长了表达量就会越大
简述
原核
和真
核表达
体系各自的优点、缺点。
答:
【答案】:
原核表达
体系的优点是培养方法简单、迅速、经济而又适合大规模生产;不足之处是只能表达cDNA,不能表达真核基因组DNA表达的
蛋白质
不能形成适当的折叠或进行糖基化修饰;表达的蛋白质常形成不溶性的包涵体。真核表达体系的优点是可表达基因组DNA,表达的蛋白质可被适当修饰,因此表达产物直接就有...
问个问题哦,我进行的是
原核蛋白表达
,表达载体是PET32a,表达菌液超声...
答:
首先得判断
蛋白
条带是否正确,因为32a表达过程中,会在目标蛋白上加上部分自己序列,所以电泳图谱中你所要表达的蛋白,应该比你自己预期的大20-30kDa。其次,
原核表达
,只是表达了酶蛋白序列,但蛋白序列与酶之间不能划等号,要有一个正确的加工之后形成合适的二、三级结构,蛋白才有活性 ...
异源
表达
系统中
蛋白质
的糖基化对sds电泳有没有影响
答:
蛋白质
的糖基化确实有可能对SDS-PAGE电泳产生影响:1.影响一:分子量的估算 糖基化会增加蛋白质的分子量。在SDS-PAGE中,蛋白质通常是根据它们的分子量来分离的。由于加上的糖链增加了蛋白质的整体分子量,因此糖基化蛋白质在凝胶上的迁移可能与预期的基于蛋白质氨基酸链的分子量不一致。2.影响二:...
原核表达
的意义
答:
问题二:真核基因
表达
调控意义是什么? 真核基因组比
原核
大得多,结构更复杂,含有许多重复序列,基因组的大部分序列不是为
蛋白质
编码的,而为蛋白质编码的基因绝大多数是不连续的。真核生物基本上是采取逐个基因调控表达的形式。真核基因表达调控的环节更多,转录前可以有基因的扩增或重排,并涉及染色质结构的改变、基因...
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