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原核表达蛋白没有表达啥原因
原核表达
分子量特别小,跑胶是不是看不到啊
答:
不然你的蛋白会因为跑出胶而看不到。然后如果你的胶浓度正确的话(一般看和你蛋白对应的Marker是否跑出胶),还看不到蛋白带,那么只有可能是你的
蛋白表达
量低了或者根本
没有表达
,你需要1,更改诱导条件,提高蛋白表达量。2,质粒测序,看目标片段在装入载体的时候是否发生了移码错误。
检测
原核表达蛋白没有
需要将菌体超声波破碎吗
答:
检测
原核表达蛋白不
需要将菌体超声波破碎的,
原因
如下:1、如果是仅仅检测
原核蛋白
是否
有表达
,可以直接将菌体重悬于蒸馏水中,并使用SDS-PAGE的方法检测。2、如果需要检测原核蛋白是否有可溶表达,则需要将菌体超声波破碎之后再检测是否有可溶表达。3、所以检测原核表达蛋白不需要将菌体超声波破碎的。超声...
关于
原核表达
问题
答:
OD600只能看出菌体浓度,一般超过1.0才够,我们的经验是500ml的菌液在锥形瓶里摇到发白,手掌放在瓶底下从上面看
不
清手指了,就OK了,但关键还是要看你的目的蛋白浓度,条带会变成很明显的一大团。诱导的起始浓度是要测定的,一般都是1.0,诱导时间是取样以后根据诱导
蛋白表达
情况测定的,
没有
统一...
为什么
原核
生物不能完整的
表达
真核生物的基因
答:
这和基因的结构有很大关系。二者结构上略有
不
同 先来明确几个概念吧。核DNA只有一部分是基因,基因与基因之间还有无效的区段,这也就是为什么有的遗传物质的改变不是基因突变的
原因了
。(这一部分
原核
与真核是一致的)。有遗传效应的区段是基因,而基因里面包含外显子核内含子。在转录的时候二者都会...
利用
原核表达
系统所产生的某些真核
蛋白
通常
不具有
生物学活性的
原因
...
答:
2.IF:用高浓度的盐(如0.5mol/LKCl)洗涤核糖体,可使核糖体解离为亚基,但这些核糖体亚基在
蛋白质
生物合成的起始阶段
没有
活性。后来从盐洗涤液中分离出三种蛋白质因子,当把这三种因子加入盐洗过的核糖体后,核糖体再现了活性,故将这三种蛋白质因子依次命名为IF1、IF2和IF3.在70S起始复合物形成...
真核生物的基因在
原核
生物基因进行
表达
时的注意事项 有哪些
答:
2,所选的表达体系是否合适,有时,你需要表达的基因可能来源于真核生物的线粒体或叶绿体,其中是否有稀有密码子,否则会影响表达效率,表达的
蛋白
是可溶的还是包涵体,是否需要分泌型表达;3,
原核表达
的蛋白是
没有
糖基化修饰的,如果你的目的蛋白本身有糖基化,而且是后续研究必须的,就不适合用原核表达;4,...
原核
生物
蛋白质表达
与真核生物蛋白质表达的区别
是什么
答:
最主要区别,
原核
生物基因
没有
内含子,不会对
表达
的mRNA做剪切修饰,这就使得一些真核
蛋白不
能正确的折叠,导致活性降低或者失活。真核细胞有一套自己的表达修饰系统,可以对类似的蛋白进行修饰。
真核基因在
原核
细胞中
表达
需要解决哪些问题
答:
第二,要用原核的启动子.检查一下真核基因密码子偏好是否存在
原核表达
系统的稀有密码子.那个稀有密码子的氨基酸会成为表达量的瓶颈.如果有,点突变之.第三,真核基因可能在表达过程中需要有分子伴侣帮助折叠成正确的构象才会有活性.如果单独的
蛋白没有
活性,应该考虑是否需要同时克隆分子伴侣基因.第四,注意...
‘’。。。
原核
生物
表达的蛋白质有
生物活性吗生物活性一定要从内质网...
答:
没有 因为
原核
转录
表达的蛋白质没有
进行加工修饰 不能形成正常的空间结构 所以没有活性!
真核细胞表达和
原核
细胞
表达有什么不
同?他们表达产生的活性
蛋白有什么不
...
答:
首先得从细胞的结构说起:真核细胞具有各种胞内细胞器,而
原核
细胞却除核糖体之外不存在其他细胞器。这与基因的
表达
是密不可分的。真核细胞的基因是有外显子和内含子组成的,而原核细胞却无此之分。在细胞内DNA进行转录是都是从启动子开始,按照碱基互补配对原则依次进行。只是翻译产物会有所不同,...
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