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大肠杆菌表达载体的优缺点
回答有关生物工程的问题:(1)构建基因工程
表达载体
时,用不同类型的限制...
答:
若受体细胞是微生物细胞(如
大肠杆菌
),常用CaCl2处理微生物,使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞,这样有利于
表达载体
进入受体细胞;为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用采用分子杂交技术,即用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交.为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素,常用抗原-...
【求助/交流】请问bluescript是哪种类型的
载体
答:
!�fl204(站内联系TA)pBluescript-SK是一般的克隆载体,和pUC19很类似。如果构建转化用
载体的
话只能用做中间载体。不过如果只是做瞬时
表达
的话应该不会有问题。ben1147(站内联系TA)pBluescript是
大肠杆菌
宿主的克隆质粒,没有酵母的复制起点,在酵母里没法复制。pBluescript-SK是一般的克隆载体...
求助:分子生物学考博试题:在
大肠杆菌
中
表达
动物激素的基因可能遇到的问...
答:
现在,这个合成基因可被插入
载体
中。③有时加工过程可以在离体条件下进行。如果加工有困难,可以用合成基因,从而免除加工过程。④选用合适的突变型宿主从而防止蛋白酶水解。如果用酵母作为宿主上述许多问题都可以较容易地解决,尤其是现在有既能在
大肠杆菌
中又能在酵母中复制的穿梭质粒载体。说明:1)ATG,TAG...
植物基因中的
大肠杆菌
原核
表达
方法谁知道?生物医学工程方面的信息哪里...
答:
通过
大肠杆菌表达
目的基因大量获得重组蛋白是一个方便快捷的方法。植物中克隆的目的基因被克隆到特异设计的质粒
载体
上,受噬菌体T7强启动子控制;表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导。当需要表达蛋白时,在细菌培养基中加入IPTG来启动表达。不同载体在邻近克隆位点处具有编码不同的多肽“标签”的序列,在...
pbad 系列
载体
用什么
大肠杆菌表达
蛋白
答:
(1)构建基因
表达载体
时,需要用限制酶BamH I切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒,再用DNA连接酶将目镜基因和质粒连接形成重组质粒,再与
大肠杆菌
感受态细胞混合.因为重组质粒含有氨苄青霉素抗性基因,所以最后将混合物接种在含有氨苄青霉素平板培养基上培养,以筛选含有重组质粒的大肠杆菌.(2)①第1组...
基因载体与基因
表达载体的
区别?
答:
一、构成不同 基因表达载体:构成包括启动子、终止子、标记基因、目的基因。重组质粒:构成包括目的基因片段、质粒、酶。二、对象不同 基因表达载体:基因
表达载体的
对象通常是活细胞。重组质粒:重组质粒的对象通常是细菌。三、原理不同 基因表达载体:将不同来源的基因在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞...
构建基因
表达载体
用的启动子来自哪里
答:
一般都死大家熟知的微生物(如
大肠杆菌
)上,某个固定的强启动子拿来用,当然你要保证它能够在你需要
表达的载体
内表达,完成相应的修饰即可。
大肠杆菌表达
菌株JM109,Top10,Rosetta各自
有什么
特点啊,如何选择?_百度...
答:
大多数
大肠杆菌
菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。 常用的菌株都会产生dam,dcm,从而受到甲基化的影响.部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割,如FbaI和MboI等,一般生物公司提供的内切酶说明中均...
如何扩增及提取
表达载体
?是不是导入感受态细胞培养,然后直接提取质粒就...
答:
不对,通过转化到感受态细菌中,不是细胞。感受态的
大肠杆菌
,可以自己制作也可以通过购买。之后将细菌凃到含有抗生素的板子上,长出克隆后挑取单克隆,将单克隆加入含有抗生素的细菌培养基中培养,之后提取质粒,提取质粒可以购买相应的试剂盒,按照试剂盒的说明书操作即可。质粒是带有抗性基因的,只有含有该...
整合
载体
与穿梭载体有何区别?
答:
由于此类型的
载体
既可在
大肠杆菌
细胞中复制,也可在酿酒酵母细胞中复制,因此在遗传学研究中很受欢迎。它使研究工作者可自如的在两种不同的寄主细胞之间来回转移基因,并单独或同时在两种宿主细胞中研究目的基因的
表达
活性及其它的调节功能。3.其它穿梭载体 在哺乳动物、植物、昆虫细胞等细胞中使用的表达...
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