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如何得到大量原核表达的蛋白
请说明在
原核
细胞中
表达
真核基因,合成真核
蛋白
存在的主要问题。
答:
此外,
原核
生物的基因中不含内含子,真核生物基因中存在内含子。内含子是真核生物细胞DNA中的间插序列。这些序列被转录在前体RNA中,经过剪接被去除,最终不存在于成熟RNA分子中。原核细胞无法识别内含子,在
表达
真核基因时,会将内含子的序列都表达出来,这样
得到的蛋白质
可能失去了相关功能。若该基因...
原核表达
带有分泌信号肽
的蛋白
,是细胞内多还是细胞外多
答:
关键是这个信号肽
原核
细胞买不买单。一般认为,还是
原核
细胞胞内
表达
居多。如果有原核细胞毒性,表达量可能不高。
已知氨基酸序列
怎么
构建
原核
质粒
答:
所有的质粒都是在细菌(原核)中构建和扩增的,但要在真核细胞中表达需要真核表达载体,要在原核细胞中表达需要
原核表达
载体.这两种载体主要的区别是启动子和polyA加尾信号的不同,一个适合在原核细胞中表达,一个适合在真核细胞中表达. 你需要哪种质粒取决于你最终需要在哪种细胞中表达目的
蛋白
,如果你要...
融合
蛋白
的融合蛋白简介
答:
融合蛋白 - 技术概况 融合蛋白技术是为
获得大量
标准融合蛋白而进行的有目的性的基因融合和
蛋白表达
方法。利用融合蛋白技术,可构建和表达具有多种功能的新型目的蛋白。 融合基因可在原核细胞(如大肠杆菌) 也可在真核细胞中进行表达。
原核表达
系统的特点是时程短,费用低,是科研中的主要工具。其缺点是真...
大家
原核表达
出一个基因
的蛋白
后,可以继续做哪些
答:
大家
原核表达
出一个基因
的蛋白
后,可以继续做哪些 1、Operon操纵子:一个或几个结构基因与一个调节基因和一个操纵基因,加上启动子构成一个操纵单元,这个单元称为操纵子。在操纵子中,结构基因产生mRNA并作为模板合成蛋白质;而调节基因则产生一种阻遏蛋白与操纵基因相互作用;阻遏蛋白与操纵基因结合从而...
如何
将植物细胞中基因
的蛋白表达
到酵母中?
答:
首先确定你要
的蛋白
的基因。设计好引物,然后提取植物总RNA,接着反转录克隆出cDNA,然后将cDNA插入到
原核表达
质粒中再转化酵母。用PCR筛选阳性克隆,测序,表大蛋白。
求助做夹心ELISA时,夹心抗体的选择
答:
原料:双抗体夹心寻找配对抗体问题 双抗体夹心ELISA 方法步骤:若要检测的抗原为某种新的病毒(你手上没有该种病毒或全世界都没有分离出该病毒,该病毒为最近报道而你在病料中克隆到了该病毒基因且做了
原核表达
并做了抗体)方法:1、
大量
做出该病毒某个
蛋白
的单克隆抗体(该蛋白基因是你在病料中
得到
...
基因
如何
导致
蛋白质
的合成?
答:
不少生物活性物质,当用基因工程方法
表达
出其肽链后,还不具备活性。因此,
如何
使该
蛋白质
实现糖基化是正在大力研究中的问题之一。 2. 一级结构的修饰 ①氨基肽酶切除肽链N-端甲酰蛋氨酸或蛋氨酸 翻译过程以fMet-tRNAfmet作为第一个注册的起始物,在蛋白质合成过程中,N-端氨基酸总是fMet(甲酰蛋氨酸),其α-...
常见的
原核表达
载体有哪些
答:
启动子 启动子是DNA链上一段能与RNA聚合酶结合并起始RNA合成的序列,它是基因表达不可缺少的重要调控序列。没有启动子,基因就不能转录。由于细菌RNA聚合酶不能识别真核基因的启动子,因此
原核表达
载体所用的启动子必须是原核启动子。 原核启动子是由两段彼此分开且又高度保守的核苷酸序列组成,对mRNA的...
原核
体系中
表达
真核基因的困难
答:
主要是
原核表达
体系的翻译后加工修饰修饰不完善(化学修饰:如乙酰化、甲基化、糖基化、泛素化……),无法赋予表达产物本来的活性;另外原核体系
表达的蛋白
常以包涵体的形式表达,纯化困难,另外蛋白经变性复性后可能会影响蛋白的生物学功能。其他的问题你再查查相关的书吧 ...
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