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如何得到大量原核表达的蛋白
为什么要让真核生物的基因在
原核
生物中
表达
并纯化
蛋白
呢?
答:
实际上真核生物
的蛋白
也可以用真核细胞
蛋白表达
系统来实现,而且效果往往更好。用原核生物来表达主要还是因为操作简单,快速。如果希望表达和纯化的蛋白性质稳定,经原核系统表达之后仍然有正确的折叠构象,那么使用
原核表达
系统就很合适了。
G418筛选后
如何
确保
得到
遗传稳定且强
表达
目的
蛋白
的细胞克隆?
答:
in H2O)溶解性:清澈溶液(100mg/ml in H2O)储存条件:4℃保存,有效期2年G418 Sulfate是一种氨基糖苷类抗生素,与庆大霉素相似,主要作用于细菌、酵母、原生动物、高等植物和哺乳动物的
原核
或真核细胞,通过抑制
蛋白
合成达到筛选目的。它在转化了含有抗新霉素基因质粒的真核细胞筛选中具有广泛应用。
为什么
原核
生物不能完整的
表达
真核生物的
答:
为什么
原核
生物不能完整的
表达
真核生物的 真核生物的基因中编码
蛋白质
的序列中有内含子和外显子之分,其中内含子是不能决定氨基酸的序列。真核生物的细胞核基因转录成mRNA后要进行加工,将内含子转录的部分剪切掉,只剩下外显子转录的部分。而原核生物的基因中没有内含子和外显子之分,基因转录后也...
用甲醇诱导毕赤酵母
表达
目的
蛋白
前,为什么用甘油扩菌
答:
酵母表达系统作为一种后起的外源
蛋白表达
系统,由于兼具
原核
以及真
核表达
系统的优点,正在基因工程领域中
得到
日益广泛的应用,应用此系统可高水平
表达蛋白
,且具有翻译后修饰功能,故被认可为一种表达大规模蛋白的强有力的工具。常用的酵母表达系统:一,酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)表达系统:酿酒酵母(Sae...
...
原核
生物在没有高尔基体等细胞器的情况下
如何
对遗传物质进行加工从 ...
答:
遗传蛋白是什么?蛋白不具有遗传性(阮蛋白特殊)
原核
生物若要产生分泌蛋白,由于其不具有高尔基体等细胞器,我认为,分泌蛋白来源于其胞吐作用。你这里所谓的加工是否指参与复制和转录用
的蛋白
?加工遗传物质所需蛋白,对于一个处于合适生长环境的原核生物来说,除部分原料外,是可以通过自身的核糖体合成...
如何
利用基因工程技术来
表达
某种
蛋白质
抗原
答:
根据其定义,重组蛋白的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而
获得的蛋白质
。其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前主要应用的重组
蛋白的表
...
几种常用
的蛋白
标签的功能和优点
答:
GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶,它的天然大小为26KD。将它应用在
原核表达的
原因大致有两个,一是因为它是一个高度可溶
的蛋白
,希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性;另一个是它可以在大肠杆菌中
大量表达
,起到提高表达量的作用。GST融合表达系统广泛应用于...
如何
利用基因工程技术来
表达
某种
蛋白质
抗原?
答:
根据其定义,重组蛋白的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而
获得的蛋白质
。其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前主要应用的重组
蛋白的表
...
求助做夹心ELISA时,夹心抗体的选择
答:
原料:双抗体夹心寻找配对抗体问题 双抗体夹心ELISA 方法步骤:若要检测的抗原为某种新的病毒(你手上没有该种病毒或全世界都没有分离出该病毒,该病毒为最近报道而你在病料中克隆到了该病毒基因且做了
原核表达
并做了抗体)方法:1、
大量
做出该病毒某个
蛋白
的单克隆抗体(该蛋白基因是你在病料中
得到
...
原核
生物的mRNA是连在一起的吧,那它
的蛋白质怎么
分开的
答:
原核
生物中,细胞内没有核膜,染色质存在于胞质中,所以转录与翻译进行的场所没有明显的屏障。在转录尚未完成时,翻译就已开始了。而且,mRNA的寿命十分短暂。(2)真核生物mRNA生成。真核生物转录作用生成的mRNA为单顺反子,即一个mRNA分子只编码一种
蛋白质
。真核生物的结构基因中包含有具有
表达
活性的...
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