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构建真核表达载体
最常用的
真核
细胞
表达载体
有哪些?各在哪些细胞中表达?
答:
1.pCMVp-NEO-BAN载体 特点:该
真核
细胞
表达载体
分子量为6600碱基对,主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架构成,在大多数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因.2.pEGFP,增强型绦色荧光蛋白表达载体(Enhanced Fluorecent Protein Vector)特...
如何
构建
一个基因的过
表达载体
?是要
真核表达
的
答:
基因
表达载体
的
构建
(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。 将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体, 首先要用一定的限制酶切割质粒,使质粒出现一个缺口,露出黏性末端。然后用同 一种限制酶切断目的基因,使其产生...
质粒
真核表达载体
的特点
答:
质粒
真核表达载体
是一种用于真核细胞中基因表达的DNA质粒。它具有以下几个特点:1、载体大小:质粒真核表达载体通常较小,一般介于2kb到10kb之间。这有助于方便质粒的
构建
、转染和表达。2、基本元素:质粒真核表达载体通常包含了一系列基本元素,例如启动子(用于启动基因表达)、转录终止序列、选择性标记...
根据
真核
基因在原核细胞中表达的特点,
表达载体
必须具备那些条件?_百度...
答:
【答案】:(1)能够独立的复制;(2)具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记,以利于外源基因的克隆、鉴定和 筛选;(3)应具有很强的启动子,能为大肠杆菌的RAN聚合酶所识别;(4)应具有阻遏子 (5)应具有很强的终止子 (6)所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号。
两个基因融合
构建真核表达载体
需要去掉信号肽吗?
答:
信号肽?从ATG之后一定有一段是信号肽啊,如果是
表达
融合蛋白的话第一个序列需要ATG,第二个序列就不需要ATG了,但是读码框一定要是对的,不能出现读码框移
shRNA
真核表达载体构建
的TRC及TRC shRNA库
答:
MIT、Academica Sinica (Taiwan)和另外5个国际性组织,代表着RNA干扰领域的全球最顶尖水平。该组织计划在3年内
构建
数量达15,000个人类基因和15,000个小鼠基因的shRNA文库。第1版的TRC shRNA文库包括35,000 shRNA克隆(其中人类基因有5300个,小鼠基因有2200个),其它新构建的克隆每个季度会陆续公布。
如何
构建载体
答:
载体构建
目的 ①用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去。②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制(称为克隆)。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。具体过程详解如下图所示:
真核载体构建
目的基因没有突变,载体插入了一个碱基有什么影响
答:
1)
真核表达载体
和原核表达载体就是能在真核生物或原核生物中表达的载体,它们一般都带有能在真核生物或原核生物中表达的必需表达元件;2)真核表达和原核表达的目的都是为了能够大量获得自己所需要的目的基因的表达产物,最好有生物活性,以便下一步的实验需要.3)原核表达载体一般只能在原核生物中表达外源...
shRNA
真核表达载体构建
的原装进口shRNA表达系统
答:
此shRNA数据库亦有一套原装进口的shRNA表达系统相匹配,针对每个基因的一套shRNA序列均已
构建
至相应的shRNA表达载体上,可直接使用,整套产品均为原装进口。此系统中,装载shRNA序列的
真核表达载体
,同时也是YRBIO第三代慢病毒包装系统中的穿梭载体。也就是说,如果目的细胞质粒转染效率较低,那么只需...
siRNA的体内是怎样转录的?
答:
体内转录:最近有几个研究小组
构建
了一些可以在
真核
细胞内
表达
siRNA的
载体
,包括被广泛应用的质粒载体和新研发的转染效率较高的病毒载体。质粒载体(以Ambion公司提供的Psilencer系列质粒为例)都包含有一个RNA聚合酶Ⅲ(Pol:Ⅲ)启动子和一个45个连续的T构成的转录终止位点以及选择标记,选用Pol:Ⅲ启动...
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