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真核蛋白表达及纯化步骤
简要阐述
真核
生物如何实现其基因
表达
调控?
答:
一.转录起始的选择 在
真核
生物中同一个基因由于转录起始的不同可以产生不同类型的酶。例如酵母蔗糖酶基因以一种分散的多基因家族存在,有6个基因(Suc1~5,7)位于不同的染色体上。每一个基因都可以转录合成蔗糖酶,但有胞内酶和胞外酶两种不同形式。前者的合成不受葡萄糖存在的影响,但含量低;...
真核
生物基因
表达
调控难点有哪些方法
答:
原核细胞
和真核
细胞的基因
表达
都包括转录和翻译两个
过程
。基因表达调控在原核细胞和真核细胞中基本相似,但是真核细胞中的过程更复杂。基因表达调控可以发生在从DNA到mRNA到
蛋白质
的任何
步骤
中。可以是染色体自身水平的控制,或者是通过控制转录和翻译来控制表达;还有更令人惊奇的是在蛋白质合成之后,通过...
真核
生物mrna的转录后加工方式有哪些
答:
真核
生物编码
蛋白质
的基因以单个基因为转录单位,但有内含子,需切除。信使RNA的原初转录产物是分子量很大的前体,在核内加工时形成大小不等的中间物,称为核内不均一RNA(hnRNA)。其加工方式包括:1、5’端加帽子:在转录的早期或转录终止前已经形成。首先从5’端脱去一个磷酸,再与GTP生成5’,5...
原核体系中
表达真核
基因的困难
答:
主要是原
核表达
体系的翻译后加工修饰修饰不完善(化学修饰:如乙酰化、甲基化、糖基化、泛素化……),无法赋予表达产物本来的活性;另外原核体系表达的
蛋白
常以包涵体的形式表达,
纯化
困难,另外蛋白经变性复性后可能会影响蛋白的生物学功能。其他的问题你再查查相关的书吧 ...
为什么活性
蛋白质
必须由
真核
细胞
表达
答:
答案:一般真核生物来源的
蛋白质
用
真核表达
,原核生物来源的用原核表达,因为真核生物和原核生物有密码子偏好,比如说同一个氨基酸可以由A和B两种密码子编码,真核生物偏好A,含有A的序列在真核中表达量较高,否则,含有B的序列表达量很低.百度教育 ...
westernblot的原理及操作
步骤
,应用有哪些
答:
该技术也广泛应用于检测蛋白水平的
表达
。操作
步骤
(一)
蛋白质
样品获得:细菌诱导表达后,可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞,
真核
细胞加匀浆缓冲液,机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃,13,000g离心15min。取上清液作为样品。(二)电泳:制备电泳凝胶,进行SDS-PAGE。(三)转移:(半干式转移...
【领康时代CDMO】通用强大型
真核表达
系统 —— 杆状病毒与昆虫细胞_百 ...
答:
在生物制药领域,昆虫细胞杆状病毒
表达
系统(IC-BEVS)凭借其独特的特性,正在成为
真核蛋白
高效表达的首选平台。它以其对哺乳动物安全无害、可实现高等级后修饰等优点,成为了重组蛋白的黄金载体。杆状病毒基因组以大环DNA为特征,主要分为α、β、δ和γ四类,其中α型如AcMNPV,以其丰富的感染形式和...
简述
真核
基因
表达
调控的7个层次
答:
简述
真核
基因
表达
调控的7个层次如下:1、DNA 水平的调控:DNA 序列本身可以影响基因表达的水平,比如启动子区域和转录因子结合位点的存在与否会影响基因的转录率。2、转录后的调控:转录后的 RNA还需要经过修饰和加工,比如剪切、剪接和聚合酶 2的磷酸化等
过程
,这些过程会影响 RNA 的转运和翻译。3、RNA...
真核
生物的基因
表达
调控的
过程
答:
转录水平调控主要涉及转录起始的调节、聚合酶的转录调节、特定转录因子的调节作用等。转录后调控主要是RNA加工的调节、mRNA转运的调节和mRNA稳定性的调节,第一个又包括剪接机制和RNA编辑;第二个主要是在mRNA转录加工后,细胞通过对把mRNA从
核
内运到胞质进行翻译的
过程
进行调控来参与对整个细胞的基因
表达
的...
蛋白表达
用哪种表达方式比较好呢?常用的表达方式是哪种呢
答:
酵母
蛋白表达
系统以甲醇毕赤酵母为代表,具有表达量高,可诱导,糖基化机制接近高等
真核
生物,分泌蛋白易
纯化
,易实现高密发酵等优点。缺点为部分蛋白产物易降解,表达量不可控。哺乳动物细胞和昆虫细胞表达系统主要优点是蛋白翻译后加工机制最接近体内的天然形式,最容易保留生物活性,缺点是表达量通常较低,...
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