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蛋白原核表达纯化原理
望简述真核细胞中
蛋白质
的合成过程!
答:
基因的遗传信息在转录过程中从DNA转移到mRNA,再由mRNA将这种遗传信息
表达
为
蛋白质
中氨基酸顺序的过程叫做翻译。翻译的过程也就是蛋白质分子生物合成的过程,在此过程中需要200多种生物大分子参加,其中包括核糖体、mRNA、tRNA及多种蛋白质因子。翻译基本过程如图1。图1 翻译过程的基本
原理
参与蛋白质生物合成的物质 (一...
真核细胞
表达
和
原核
细胞表达有什么不同?他们表达产生的活性
蛋白
有什么不...
答:
首先得从细胞的结构说起:真核细胞具有各种胞内细胞器,而
原核
细胞却除核糖体之外不存在其他细胞器。这与基因的
表达
是密不可分的。真核细胞的基因是有外显子和内含子组成的,而原核细胞却无此之分。在细胞内DNA进行转录是都是从启动子开始,按照碱基互补配对原则依次进行。只是翻译产物会有所不同,...
以乳糖操纵子为例
原核
生物基因
表达
调控的
原理
答:
上述问题决定于DNA的结构、RNA聚合酶的功能、
蛋白
因子及其他小分子配基的互相作用,在转录调控中,现已搞清楚了细菌的几个操纵子模型,现以乳糖操纵子和色氨酸操纵子为例予以说明。乳糖操纵子模型 1.乳糖操纵子 法国巴斯德研究所著名的科学家Jacob和Monod在实验的基础上于1961年建立了乳糖操纵子学说,现在...
为什么真核基因在
原核
细胞中
表达
出来的
蛋白质
常常失去活性
答:
1.真核基因多含有内含子,在
原核
细胞内,无法将内含子剪掉.合成的
蛋白质
就就不是正确的氨基酸序列,也无法折叠形成正确的空间结构(高级结构).而正确的空间结构是维持蛋白质生物学活性必不可少的.变性的蛋白质,之所以失去生物学活性,就是因为空间结构遭到破坏.2.蛋白质在内质网上的核糖体合成后,都有一...
为什么真核基因在
原核
细胞中
表达
出来的
蛋白质
常常失去活性
答:
1.真核基因多含有内含子,在
原核
细胞内,无法将内含子剪掉。合成的
蛋白质
就就不是正确的氨基酸序列,也无法折叠形成正确的空间结构(高级结构)。而正确的空间结构是维持蛋白质生物学活性必不可少的。变性的蛋白质,之所以失去生物学活性,就是因为空间结构遭到破坏。2.蛋白质在内质网上的核糖体合成后,...
如何使外源
蛋白
在
原核
系统高效、可溶性
表达
且易于
纯化
?
答:
用 GST 或者 MBP这种成熟的系统 应该适用于大部分
蛋白
在做
原核表达
时带his组氨酸的目的
蛋白
怎么也结合不上镍柱,为什么?_百度...
答:
首先找一种正常的标签
蛋白
进行一下
纯化
试验,如果能够纯化出来那就是你的蛋白的问题,可能是蛋白在
表达
的时候非正常折叠,标签被折叠在内部,没有在蛋白表面游离着,这样的话当然不会被镍柱捕获了。比较严重的情况就是包涵体的形成,是否形成包涵体你可以根据蛋白的性质反应或者是电泳检测一下离心后的细胞...
为什么活性
蛋白质
必须由真核细胞
表达
答:
答案:一般真核生物来源的
蛋白质
用真核表达,原核生物来源的用
原核表达
,因为真核生物和原核生物有密码子偏好,比如说同一个氨基酸可以由A和B两种密码子编码,真核生物偏好A,含有A的序列在真核中表达量较高,否则,含有B的序列表达量很低.百度教育 ...
...为什么无法在
原核
生物中
表达
出具有活性的
蛋白质
产物?这是一道遗传...
答:
你好,真核生物的DNA中有内含子和外显子,在真核生物中的
蛋白质表达
时,有高尔基体,内质网这些细胞器进行加工,将基因中内含子表达出的肽链部分剪切掉,外显子表达的肽链部分连接起来,这就是所谓有活性蛋白质的一级结构,通过折叠在形成有活性的一定空间结构的蛋白质。而
原核
生物基因中没有内含子和外...
原核
生物中
表达
真核
蛋白
应该注意什么问题
答:
基因需为cDNA,不能含有内含子,原核细胞不能对mRNA进行剪切;要分析DNA序列信息,分析其密码子,由于原核与真核生物的密码子偏好性不同,所以有时可能会出现稀有密码子而影响表达的情况;要注意你要
表达蛋白
的大小问题,一般情况下大于70KD的蛋白在原核菌种不容易表达或表大量低;
原核表达
出来的一般是...
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