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蛋白表达要去除信号肽吗
木霉
表达
系统
答:
在
蛋白质表达
的研究中,影响蛋白产量的因素包括启动子强度及启动子拷贝数、
信号肽
等。另外,内源基因的高效表达可能会影响外源蛋白的产量。 高效表达的基因,其启动子必定具有较高的转录起始效率。选择强启动子构建外源基因表达系统,是提高外源蛋白质表达量的一种重要策略。另外,启动子与受体细胞之间的合理匹配是外源基因...
包涵体怎样产生的,怎样提高大肠杆菌中外源
蛋白
可溶性
表达
答:
2,降低诱导剂的用量,比如0.1mM IPTG诱导。甚至更极端的可以不加诱导剂,形成泄漏
表达
。这种情况下表达出来的
蛋白
一定是可溶表达。3,更换不同的表达载体,表达菌株。比如个人感觉pET28比pET21,Rosetta的菌株比BL21(DE3)更容易可溶表达。4,更换表达系统增加
信号肽
,外源基因导入酵母系统或者哺乳动物细胞...
信号肽
是什么?
答:
这个过程涉及信号识别颗粒(SRP),一个由11种
蛋白质
和一个小RNA组成的复合体,它在附着核糖体到膜上以及调控翻译的暂停和恢复中起着至关重要的作用。SRP有三个主要功能:一是识别新生分泌蛋白的
信号肽
,二是与膜上的受体结合,三是实施延伸制动,即暂时阻止翻译过程。当SRP与受体结合时,信号肽被释放...
信号肽
是什么?
答:
信号肽
是引导新合成的
蛋白质
向分泌通路转移的短(长度5-30个氨基酸)肽链。常指新合成多肽链中用于指导蛋白质的跨膜转移(定位)的N-末端的氨基酸序列(有时不一定在N端)。在起始密码子后,有一段编码疏水性氨基酸序列的RNA区域,该氨基酸序列就被称为信号肽序列,它负责把蛋白质引导到细胞含不同膜...
分泌
蛋白
设计引物时
需要
注意什么
答:
这要看你用什么载体、宿主菌是什么,以及是否是融合
表达
.分泌融合表达的话,载体上一般都带有
信号肽
序列和其实密码子AUG,引物不用特别设计,只要引物序列的碱基数不会导致插入外源序列的ORF乱码即可.
信号肽
是什么
答:
信号肽
经由膜中
蛋白质
形成的孔道到达内质网内腔,随后被位于腔表面的信号肽酶水解,由于它的引导,新生的多肽就能够通过内质网膜进入腔内,最终被分泌到胞外。参考资料:http://baike.baidu.com/view/433558.htm
蛋白质
等大分子物质通过核孔为什么要消耗能量???
答:
蛋白质
等大分子物质通过核孔属于主动运输,
需要
载体转运,所以要消耗能量。最初生物学家将核孔命名为细孔,但实际上它并不是经常单纯开放着的孔,而是有选择地进行着物质的透过。例如,某种蛋白质分子,其直径虽仅有10毫微米,但它却不能从细胞质进入到核内。另外核孔也并不是完全不使大的颗粒透过,已...
怎样构建融合
蛋白
答:
可以通过化学方法连接,也可通过基因的融合来实现。在基因操作中,对一些分子数小的多肽基因常采用融合的方法与某一基因(如lac)相连,二者之间接上某一酶(如凝血酶)的切口,以增加在体内
表达
后产物的稳定性,也有的故意使两个分子串连融合以提高疗效,如IL-3与GM-CSF。也有与分泌性
蛋白
的
信号肽
...
为什么有些在原核细胞中
表达
的真核
蛋白
没有生物活性
答:
原核生物没有真核加工目的蛋白的酶(切去内含肽,
信号肽
)或分子伴侣,及修饰(如糖基化)等,
蛋白质
必须有正确构象才有活性,原核生物只是
表达
出前体。
突然有个新奇的想法?原核生物膜上的
蛋白
怎么过去的?
答:
因为原核生物的合成
蛋白质
的酶系大都在细胞膜上,所以细胞膜上含有大量的蛋白质。另外一些小分子物质可以扩散入细胞,细胞再利用这些物质合成蛋白质,并不是说膜上的Pr一定要由内质网才能合成!
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