使用pET-28a载体，大肠杆菌表达外源基因，可是出来两条带，挨得很紧，并且都能够挂Ni柱，不知道为什么，从开始表达就出现，一直到纯化，都存在着
两条带从SDS-PAGE胶上可以看出相差大约2KD左右，都能够和镍柱结合，包涵体处理后也是很浓的两条带。二聚体的可能性不大，如果是二聚体，应该分子量差两倍左右的吧。
是不是形成二聚体了？或目的蛋白内部有某个酶的位点，被水解掉一段
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第1个回答 2008-10-08
我觉得你可以根据分子量大小来过下柱子吧，选择分子量合适的。
但是为什么出现了2条带，我也不是很清楚。不正确表达的情况有很多。建议你上网多查查，百度知道里问不出来什么的。
但是为什么出现了2条带，我也不是很清楚。不正确表达的情况有很多。建议你上网多查查，百度知道里问不出来什么的。
第2个回答 2008-10-08
两个分子量大概差多少？
