如题所述
检测原理：
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blueG-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色，在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nm,后者在595nm在一定蛋白质浓度范围内(1-1000μg）),蛋白质与色素结合物在595nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比，故可用于蛋白质的定量测定。
考马斯亮蓝G-250于蛋白质结合反应十分迅速，2min左右即达到平衡。其结合物在室温下1h内保持稳定。此法灵敏度高，易于操作，干扰物质少，是一种比较好的定量法。其缺点是在蛋白质含童很高时线性偏低，且不同来源蛋白质与色素结合状况有一定差异。
温馨提示：答案为网友推荐，仅供参考
第1个回答 2023-10-18
测定蛋白质含量是生物学和生物化学实验室中的常规操作。以下是用于测定溶液中的可溶性蛋白质含量的大致方法：
1. 样品制备:
取一定量的生物样品，如细胞、组织等。
使用合适的缓冲液进行匀浆或裂解。
对裂解液进行离心，收集上清液（其中包含可溶性蛋白）。
2. 蛋白浓度测定:
常用的方法有Bradford法、Lowry法和BCA法。这些方法都是基于蛋白质与试剂发生颜色反应，通过测定吸光度来估计蛋白浓度的。
根据所选的方法，添加适量的试剂到样品中。
在光谱光度计中测定样品的吸光度。
与已知浓度的蛋白质标准曲线比较，确定样品中的蛋白质浓度。
3. 结果分析:
根据标准曲线计算样品中的蛋白质浓度。
如果需要，可以进一步进行蛋白的鉴定和特性研究。
百泰派克生物科技——生物制品表征，多组学生物质谱检测优质服务商
1. 样品制备:
取一定量的生物样品，如细胞、组织等。
使用合适的缓冲液进行匀浆或裂解。
对裂解液进行离心，收集上清液（其中包含可溶性蛋白）。
2. 蛋白浓度测定:
常用的方法有Bradford法、Lowry法和BCA法。这些方法都是基于蛋白质与试剂发生颜色反应，通过测定吸光度来估计蛋白浓度的。
根据所选的方法，添加适量的试剂到样品中。
在光谱光度计中测定样品的吸光度。
与已知浓度的蛋白质标准曲线比较，确定样品中的蛋白质浓度。
3. 结果分析:
根据标准曲线计算样品中的蛋白质浓度。
如果需要，可以进一步进行蛋白的鉴定和特性研究。
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