蛋白纯化用蛹后应怎么样管理?

如题所述

你好,蛋白质储存是一个比较困难的问题。据我了解:蛋白质的储存在很大程度上取决于蛋白质本身的结构稳定性,其次,它与储存条件的优化有关;尽量避免蛋白质反复冻融。它会对蛋白质的结构和活性造成损害;正如你提到的,它将在第二天使用。无需将其置于-70℃下。一般来说,尽量安排实验周期,3天内(4℃保存)用完蛋白质是最理想的条件;如果你必须储存,你需要将它分开,放在4℃下立即使用,其他的放在低温下,一次一个;如果你有冻干机,把它冷冻成干粉,放入-70比低温下的液体好,再溶解会好得多(但许多蛋白质仍然存在失活问题);至于保护剂,如果蛋白质的稳定性不强,通常会添加甘油(5%-50%浓度)和堆积钠氮(抑菌剂),这样取出时,必须进行透析或脱盐以去除甘油和叠氮化钠,这会造成损失。相比之下,冻干粉要好得多;关于咪唑的去除问题,如果你确定咪唑的存在对你以后的实验没有影响,你就不需要去;但事实上,很多实验都会受到咪唑的影响,或者一旦你对实验有疑问,你就无法确定是否是因为咪唑,所以我建议你去咪唑,去咪唑的方法包括:透析,浓缩管离心,脱盐柱。我个人认为,脱盐柱是去除效率最高、最省时、蛋白质回收率最高的方法。
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