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做原核表达的目的
原核
共
表达
质粒是什么意思
答:
有些
原核
生物拥有独立于核DNA的质粒DNA,但不是所有的质粒DNA都可以表达,
原核
共表达质粒就是指那些可以同核DNA一起
表达的
质粒DNA。
请问,
原核表达
实验的主要实验步骤是什么?其中原核表达载体怎样构建...
答:
先克隆
目的
基因,比如PCR扩增。或者直接从其他载体酶切纯化 找到你所要的载体,一般可用TOPO TA载体来直接连接PCR产物。或者使用相应的酶切对应载体 完成连接 转染细菌,比如感受态的E coli 扩增,培养细菌 分离提纯载体
真核生物的基因能在
原核
生物中
表达
吗?原核生物能在真核生物中表达吗?为...
答:
接下来要分的就是表达系统是
原核表达
系统还是真核表达系统,现在用的最多的是原核表达系统,因为操作简单方便而且节约成本,表达出来的蛋白能做抗体能够满足绝大多数的实验需求。如果你要
表达的
蛋白需要复杂修饰且下游应用要求高(比如制药,疫苗研究等)这个就要选择真核表达系统,真核系统表达的蛋白近似于...
做蛋白的
原核表达
时为什么总是不稳定,明明上次已经有表达了,现在又老做...
答:
这个很正常,我也碰到过,有时候是找不出原因的,只能再转化,设置重新开始,筛选稳定的了。
请问:真核生物的基因在
原核
生物基因进行
表达
时的注意事项 有哪些?_百度...
答:
2,所选的表达体系是否合适,有时,你需要表达的基因可能来源于真核生物的线粒体或叶绿体,其中是否有稀有密码子,否则会影响表达效率,表达的蛋白是可溶的还是包涵体,是否需要分泌型表达;3,
原核表达的
蛋白是没有糖基化修饰的,如果你
的目的
蛋白本身有糖基化,而且是后续研究必须的,就不适合用原核...
基因工程
表达
出的蛋白质怎么鉴定
答:
用相应的抗体(对抗进行同位素标记)进行抗原——抗体杂交;如果出现杂交带,表明
目的
基因已形成蛋白质产品。
原核表达
,为什么空载
表达的
很好,
目的
蛋白没有表达,可能的原因有...
答:
目的
蛋白的
表达
跟基因本身关系密切,载体,表达条件关系也很大。空载体能表达不代表你的蛋白能在该条件下表达。
pet-32a载体在进行
原核表达的
时候与
目的
基因连接时不需要酶切吗_百度知...
答:
需要啊,首先载体与
目的
基因酶切后,再用T4DNA连接酶连接起来,然后转化感受态
一个
原核表达
实验大概需要做多久
答:
从那一步做起呢? 还有你
表达
了要做什么体外实验呢?构建+测序=1-2周,转化+诱导表达=<1周,各种调试各种意外另算。。。
求
原核表达
详细步骤
答:
说起来容易做起来就要摸索了,基本步骤:
目的
基因的扩增→载体与目的基因双酶切→电泳→割胶回收→目的基因与载体的连接反应→重组体筛选→验证重组体→转化入大肠杆菌进行
表达
。问题在于:目的基因如何获取,扩增策略的决定,表达载体的选择,双酶切选择哪一对限制性内切酶,如何筛选重组体等等。
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