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原核表达系统的表达载体
基因工程问题,真核基因在
原核
细胞中如何
表达
答:
一、请删去基因中的内含子。这可以通过将该基因的cDNA连接至载体中而解决。二、所用
的表达载体
中,你所需要表达的基因必须由宿主菌能够使用的原核启动子来启动。一般商业的
原核表达
载体均有这类启动子。三、如果你需要表达的基因与宿主菌的密码子偏好有很大的不同,则需要更改这些密码子一适应宿主菌。
求详细的基因
表达载体
的组成,要详细啊~···
答:
完整
的表达载体
必须包括:1、复制子,在细菌中扩增时所必须。2、启动子,目的基因在细菌或细胞中转录所必须,转录了才能翻译,是谓“表达”。3、
原核
筛选标记,细菌增菌所必须。4、真核筛选标记,如果是真
核表达
,就是必须的。5、多克隆位点,即酶切位点,插入目的片段的区域。6、其他所需构件,可视...
请问现在
原核表达
质粒
载体
(比如PET载体)的价位大约是多少?可以去那些公 ...
答:
第一个,你可以找一找你的师兄弟有没有,再找一找同学有没有?如果有的话就省了这笔钱。或者用你们手头现有的质粒去换。如果没有,可以找一些国内的公司去买,因为一些不好明说的原因,国内一些公司也有一些。这样会便宜一些。如果放心不下,那就如楼上说的,去Merck/Novagen公司购买,当然这价格...
...构建克隆载体与
表达载体
重组子的筛选 诱导表达以及如何检测和纯化...
答:
2、设计引物的时候你也顺带设计了酶切,那么就可以通过PCR扩增你的目的基因,然后通过双酶切获得大量目的基因。后续试验要根据你需要此基因做什么研究来看了,不同研究选用不同
的表达载体
,不同实验需求是不同的,这个建议你跟你们实验室的其他人商量或者询问老师,希望这些能帮到你!
急用!一论述题:如何克隆一个功能性基因,如何在
原核系统
中高效
表达
?
答:
⑶必须利用
原核
细胞的强启动子和 SD序列等调控元件控制外源基因的表达;⑷外源基因与
表达载体
连接后,必须形成正确的开放阅读框架(open reading frame);⑸利用宿主细胞的调控系统,调节外源基因的表达,防止外源基因的表达对宿主菌的毒害。大肠杆菌表达系统是目前应用最广泛
的表达系统
,由于待表达的外源基因...
基因载体与基因
表达载体
的区别?
答:
一、构成不同 基因
表达载体
:构成包括启动子、终止子、标记基因、目的基因。重组质粒:构成包括目的基因片段、质粒、酶。二、对象不同 基因表达载体:基因表达载体的对象通常是活细胞。重组质粒:重组质粒的对象通常是细菌。三、原理不同 基因表达载体:将不同来源的基因在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞...
原核
生物大肠杆菌异源
表达
一定要切除信号肽吗?
答:
其次信号肽能否在宿主菌中能起作用(不同种类的细菌,信号肽有差异),信号肽能否被信号肽酶切除,很多情况下信号肽即使能起作用,一般也只能将表达产物分泌至细胞间质。但是如果信号肽没有除去,又不起作用,反而变成了负担。根据一些报道来自
原核的
信号肽在
表达载体
中起作用的可能性还是存在的。
基因克隆
答:
以pcDNA3.1为例,说明
表达载体
中的功能元件(图11)。 表达载体pcDNA3.1除了有克隆载体相关元件,如复制起始位点Ori,
原核
筛选标记Amp外,还有一些其他的功能元件,如表3所示。 表达载体主要用于表达蛋白或者RNA,例如现在基因编辑中常用的一个表达载体PX458(图12),可以同时表达Cas9蛋白和sgRNA。因此上面也会携带一些其他的功能...
构建
载体
时如何选择蛋白标签?
答:
标签在构建
载体
时的主要功能有两点:方便纯化和检测,以及增加蛋白可溶性。在选择标签时,我们需要根据实验需求来决定。GST标签蛋白,是一个高度可溶的蛋白,天然大小为26KD。它在
原核表达
时有两个优势:一是高度可溶,可以增加外源蛋白的可溶性;二是大肠杆菌中大量表达,提高表达量。GST融合
表达系统
在大肠...
简述常用的蛋白
表达系统
有哪些
答:
2、载体。载体的种类与宿主相匹配。根据宿主不同,分为
原核
(细菌)
表达载体
、酵母表达载体、植物表达载体、哺乳动物表达载体、昆虫表达载体等。载体中含有外源基因片段。通过载体介导,外源基因可以在宿主中表达。3、辅助成分。有
的表达系统
中还包括了协助载体进入宿主的辅助成分。比如昆虫-杆状病毒表达体系中...
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