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原核表达蛋白大小计算公式
已知碱基序列长度
怎么算原核表达
产物
蛋白大小
答:
mRNA 上的碱基数除以3=氨基酸数
关于
原核表达
问题
答:
菌浓度OD=0.6-1.0开始诱导,你可以在2h,4h,8h的时候取个样,跑一个PAGE胶考马斯染色看看总的目的蛋白浓度,每个
蛋白表达
速度不同,需要的时间不一样,一般4h就可以了,最好还要做一次超声破碎或者酶解,离心分离以后沉淀和上清分别煮样,看你的蛋白在上清和沉淀当中的分布,最好是在上清,如果没...
我做
原核表达
,PET32a连入目的基因用的是BamHI和SalI两个位点,请问表达...
答:
这说明你的目的
蛋白
没有
表达
,因为PET32a空载表达的蛋白就有20KD左右,当然诱导时间长了表达量就会越大
原核表达
时跑完电泳,条带应该是多大,是和自己的目的基因
蛋白
的分子量一...
答:
原核表达的蛋白是没有修饰作用的,
一般而言电泳表观分子量应该与蛋白分子量+标签的大小一致
。但有时候会有一定的迁移,比如用pet28a表达的蛋白进行电泳时表观分子量会比蛋白分子量+标签大5kD左右。不过通过对比未诱导的阴性对照能很清楚地看出来自己表达的蛋白。
原核表达蛋白大小
偏小
答:
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表达
出来的
蛋白
比实际
大小
要小,这是为什么?表达出来的蛋白比实际大小要小,这是为什么?2019年9月25日 | By Annsci0 主要原因有如下几个方面 蛋白本身被降解了,可以存在一些不利于该蛋白稳定的蛋白酶 翻译起始位点的问题:如果一个类似于核糖体结合位点(AA...
蛋白原核表达
答:
该感受提缺少Lon
蛋白
酶和OmpT蛋白酶,从而减少对重组蛋白的降解,补充大肠杆菌缺乏4种稀有密码子( AGA、AUA、CCC、CUA)对应 tRNA (argU、ileY、proL、leuW)提高外源基因,尤其是富含AT-或 GC-的真核基因在
原核
系统中的
表达
水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区...
以PET32为载体
表达蛋白大小
是多少
答:
所以如果这个
蛋白表达
培养的实验是第一次做的话,建议重做一遍以保证数据的准确。如果不是第一次做的话,可以对比下之前的表达数据验证下是否有影响。pet30a载体表达的蛋白分子量增大多少kda 加上前面的融合肽以及终止子之前翻译的一个肽段,最终表达的蛋白分子量是59KD左右 加上前面的融合肽以及终止子...
原核表达
分子量特别小,跑胶是不是看不到啊
答:
如果是蛋白的话,这个和分子量
大小
其实没多大关系,一般分子量小的话,你需要根据你的蛋白预测大小来调整PAGE胶的浓度,选择合适的浓度胶来跑,不然你的蛋白会因为跑出胶而看不到。然后如果你的胶浓度正确的话(一般看和你蛋白对应的Marker是否跑出胶),还看不到蛋白带,那么只有可能是你的
蛋白表达
量...
蛋白表达--
原核蛋白表达
答:
挑战与优化,如提高蛋白的可溶性表达,可通过pCold、pBAD、pGEX等载体,辅以弱启动子,巧妙地调整表达条件。若追求分泌型蛋白,可以利用编码
原核蛋白
信号肽的载体,如pET20/22,引导蛋白走向细胞外世界。优化培养条件,如调整温度、营养成分,甚至引入辅助物质,是降低包涵体形成的关键。同时,
原核表达
问题的...
原核表达
目的条带的表达还要算上质粒上的
大小
吗
答:
质粒的
大小
是DNA,与
表达
后目的
蛋白
的大小无直接关系;在算目的蛋白的大小时,要考虑的是有无标签或报告基因,如His-Tag,GST-Tag,GFP等,尤其是GST好GFP,分子量不小,必须考虑.祝好!
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