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简述外源基因表达的基本过程
简述外源基因
在pET表达载体中实现
表达的基本
原理。
答:
在pET表达载体中,
外源基因的表达
受T7噬菌体RNA聚合酶的调控,目标基因被克隆到不为大肠杆菌RNA聚合酶识别的T7启动子之下,在加入T7RNA 聚合酶之前几乎没有表达发生。加入IPTG诱导T7RNA 聚合酶的产生,激活T7启动子,启动转录,进而完成表达。
如何使
基因
得到
表达
?
答:
基因表达方法是使克隆重组体的外源基因发挥其功能或产生其所决定的生命物质的方法。
基因表达的一般过程为:DNA先转录成RNA,再由RNA转译、加工成具有活性的蛋白质
。已掌握了基因表达的基本条件,通过合理的设计使克隆的外源基因获得表达。
简述外源基因
在大肠杆菌中高效
表达的基本
原理
答:
外源基因在大肠杆菌中高效表达的基本原理,
包括:强化蛋白质生物的合成(拷贝数、转录水平、mRNA 的翻译控制)、抑制蛋白质产物的降解、维持和恢复蛋白质特向异性空间构象三方面
。将外源基因导入生物体的过程称为转化。这可以自然发生,也可以人为发生。人工转化转染方法包括:化学方法,有磷酸钙沉淀法、DEAE ...
“
基因
过
表达
”的原理
步骤
和应用是什么?
答:
一:在生产领域,人们可以利用基因技术,生产转基因食品.例如,科学家可以把某种肉猪体内控制肉的生长的基因植入鸡体内,从而让鸡也获得快速增肥 的能力.但是,转基因因为有高科技含量, 怕吃了转基因食品中的
外源基因
后会改变人的遗传性状,比如吃了转基因猪肉会变得好动,喝了转基因牛奶后易患恋乳症等等。华中农业大学的...
基因表达
给我们带来了什么
答:
基因表达方法是使克隆重组体的外源基因发挥其功能或产生其所决定的生命物质的方法。
基因表达的一般过程为:DNA先转录成RNA,再由RNA转译、加工成具有活性的蛋白质
。目前已掌握了基因表达的基本条件,通过合理的设计使克隆的外源基因获得表达。现以大肠杆菌为例说明该方法的主要步骤:首先要构建增进转录的载体...
简述外源基因
在大肠杆菌中高效
表达的基本
原理
答:
外源基因
通过载体质粒导入到了受体细胞大肠杆菌中,已经被整合到载体质粒中加以保护,因为大肠杆菌本身也存在质粒,所以外源基因不会被切割,与其它质粒一样得以
表达
。
简述
利用DNA重组技术在大肠杆菌细胞中克隆
外源基因的基本过程
?
答:
利用DNA重组技术在大肠杆菌细胞中克隆
外源基因的基本过程
通常包括以下步骤:DNA提取:从源生物体中提取所需的外源DNA片段,可以通过PCR扩增、酶切等方法获取特定的DNA序列。载体准备:选择适当的载体,常用的是质粒(plasmid)。质粒是环状的DNA分子,可以在细菌细胞中自主复制。将质粒进行线性化处理,通常通过...
简述
转
基因的基本流程
答:
第一步:获取目的
基因
1. 目的基因是指编码蛋白质的结构基因。2. 原核基因通过直接分离获得,真核基因则通过人工合成。人工合成目的基因常用反转录法和化学合成法。3. PCR技术用于扩增目的基因,其原理是DNA双链复制。
过程
包括三个
步骤
:加热至90~95℃使DNA解链,冷却到55~60℃使引物结合到互补DNA链...
简述外源基因
转入受体细胞的途径
答:
用基因工程可以使
外源基因
在受体细胞内扩增并表达。(3)最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,使目的基因能够表达和发挥作用:也是一段有特殊结构的DNA片段。(2)获取方法、
基因表达
载体的构建(1)目的:①从基因文库中获取。 (4)有时还需进行个体生物学水平的鉴定。 4;②人工合成(反转录法和化学...
外源基因
在哺乳动物细胞中
表达的
载体系统可分成几类?
简述
其主要特点及用...
答:
一类是整合型(integrated),为稳定
表达
载体系统。即
外源基因
通过这种病毒载体与宿主细胞的染色体整合,外源基因随宿主细胞基因组的复制而扩增,这类载体的代表是pSV。它们主要被用于:(1)高水平组成型蛋白质的表达;(2)疫苗的生产;(3)利用痘苗病毒表达载体或可诱导的启动子-载体系统高水平地表达具有潜在...
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