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130kda的蛋白跑出来偏小
蛋白质
的分子量在120KD,做western blot 跑胶时,用多大浓度的胶,蛋白...
答:
15% 15~45
kDA
7.5% 30~120kDA 胶浓度越大,跑
的蛋白
分子量越小,你可以选择6%的,不过那样的话你就要跑就点,一般恒压140V跑。而且你的蛋白很浅应该不一定是跟胶有关,很多因素啊。也许你的抗体不是很好用(很细我不知道你什么意思,一般都是呈带状),或者你上的蛋白太少了,一般我...
关于小分子
蛋白
的Western-blot问题,实验时的胶浓度,电压,转膜条件等等...
答:
1。
当然是胶的浓度
。9kda的话要适当增大,15-20%应该差不多吧。如果实在不行还能考虑用gradient gel。2。二是转膜缓冲液,内要含20%甲醇,新鲜配制,反复使用的话注意甲醇会蒸发掉。如果连续使用的话两三次应该还可以。甲醇一是能够洗掉跑胶时泡透了的SDS(SDS使蛋白带负电,方便移动),二是帮助蛋...
一
蛋白
质谱测定分子量10
kDa
,但是SDS-PAGE测的结果是21kDa,可能原因是...
答:
如果你跑的是非变性电泳,最大可能就是形成了二聚体。如果你跑的是变性电泳,原因就不太好说了,
可能是蛋白本身糖基化的问题
,也可能是其他的原因。
蛋白质跑
电泳想让小分子量
跑出去
,我
的蛋白
分子量为170
kda
,用的10%的...
答:
首先你分离胶的浓度有点小问题
,跑的时间较长就行了啦,只不过要自己估摸着。。。但是跑蛋白一般都要分两拨电压跑啊。。效果好点 (1)SDS-PAGE分离胶浓度 --- 最佳分离范围 (KD)6%胶 --- ---50-150 8%胶 --- ---30-90 10%胶 ---20-80 12%胶 ---10-40 (2...
wb胶的浓度
答:
有的时候蛋白跑不出来,
其实未必是分离胶浓度选的不好,也有可能是marker的问题
。marker起到的是蛋白分子量指示剂作用,但是要根据蛋白分子量选择合适的marker。一般的marker分子量范围在10-130kDa之间,都可以满足正常蛋白的需要。但有些分子量范围较广的marker,比如说6-250kDa,虽然说它范围很广,可...
western blot实验
蛋白
分子为161KD转膜时的电流及时间该怎么设置...
答:
这简单,恒流,电压最大,电流250V,时间90min,我跑的是
130kDa
...blotting,我要
的蛋白
是120多Kb,内参是GADPH,胶是8%,但是跑胶的...
答:
内参的那个线跑不
出来
,一样也能曝,因为你
的蛋白
已经在上面了,只要切胶的时候注意就可以了。另外,你120多的胶没必要用8%,用10%就够了,我200多的
kda
用10%都可以
为什么50
KDa
到70KDa之间
的蛋白
条带跑不好
答:
为什么50KD到7oKD之间
的蛋白
条带跑不好,那是因为50:K至70K之间相对来说是50k太短了,一定要上70K至90K它的柜离就相差不多的,它们的蛋条带就可以跑好。
蛋白的kda
(
蛋白kda
是什么意思)
答:
您好,我就为大家解答关于
蛋白的kda
,
蛋白kda
是什么意思相信很多小伙伴还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、生物学中
蛋白质
的分子量单位... 您好,我就为大家解答关于蛋白的kda,蛋白kda是什么意思相信很多小伙伴还不知道,现在让我们一起来看看吧! 1、生物学中蛋白质的分子量单位
kDa
也简称为kD 1kDa=1000摩尔质量...
Western Blotting,我做了个His-tag
的蛋白
,大概11
KDa
大,怎么做出的Weste...
答:
非特异性吧~不能排除封闭和抗体的问题 现在的温度封闭一个小时怕不够,我们实验室用的25℃封闭2h,一般没有非特异性,封闭用的是牛奶和TBST 不好的抗体容易出非特异性,以前出现过这种情况,换抗体就好了
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