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原核表达真核蛋白后怎么处理
求助做夹心ELISA时,夹心抗体的选择
答:
做双抗体夹心ELISA 夹心抗体的选择单克隆抗体制备时很多朋友会遇到这样的问题,即我们免疫用的蛋白为
原核表达
蛋白而目的蛋白是
真核蛋白
或病毒等,因为没有标准品我们做出来的抗体没有办法用标准品来验证是否与其发生反应,最终导致我们做出的是无用抗体。本人亲身经历,总结一下几种方法供大家参考,希望对...
试比较
原核
生物与
真核
生物基因
表达
调控特点的异同。
答:
(3)阻遏
蛋白
与阻遏机制的普遍性。
原核
基因调控普遍涉及特异阻遏蛋白参与的转录开、关调节机制。
真核
基因
表达
调控的特点:(1)RNA聚合酶:真核RNA聚合酶有三种,即RNA pol Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,分别负责三种RNA转录。TATA盒结合蛋白为三种聚合酶所共有。(2)活性染色质结构变化:当基因激活时,可观察到染色体相应...
PET-22B
原核表达
载体的信号肽可以被切除吗?
答:
你是说6×his的标签么?这个标签很小的,一般不需要切去,对实验没什么影响。但一定要切去的话,可以用凝血酶切除,切除方法参照酶的说明书,切去后在再做一次
蛋白
纯化。祝 好运~
原核表达
的意义
答:
真核
基因组比
原核
大得多,结构更复杂,含有许多重复序列,基因组的大部分序列不是为
蛋白质
编码的,而为蛋白质编码的基因绝大多数是不连续的。真核生物基本上是采取逐个基因调控
表达
的形式。真核基因表达调控的环节更多,转录前可以有基因的扩增或重排,并涉及染色质结构的改变、基因激活过程。转录后调控的方式也很多,但...
...加完标签
之后
想要用
真核表达蛋白
,应该加什么标签啊?
答:
理论上,都是可以用于
真核表达
的,这些标签只要不会影响蛋白本身活性就没有任何问题。给你举个离子,在植物转基因中,就有一经典方法检测
蛋白表达
情况的,就是在
蛋白后面
带上his tag,然后待转基因植株出来后,就用抗his taq的抗体(商用的,有卖)做western或者ELISA去检测和定量转入的蛋白。这种方法...
真原核
基因
表达
的区别
答:
当一个有缺陷时另一个可以补充;2、
原核
生物染色体不与组蛋白结合,省去的解聚的步骤;3、原核生物的转录与翻译都在同一区间,而
真核
是分开的;4、真核生物基因内有内含子,mRNA会有一个自我剪接的修饰过程,原核生物则不会;5、真核生物
蛋白质
的翻译后修饰比
原核
的更复杂 ...
对于
原核
生物与
真核
生物核糖体与mrna识别的信号分别是什么
答:
这些
蛋白质
除了可以通过修饰改变其结构以识别mRNA之外,还可以通过蛋白质的多态性来识别mRNA。而
真核
生物核糖体则更加复杂,可能会由数十个蛋白质组成,其通过核糖体蛋白质结合mRNA上的信使RNA来识别mRNA,并且这些信使RNA可以被调控,以改变核糖体蛋白质的结合,从而达到调控mRNA
表达
的目的。
试述
原核
生物复制、转录及
蛋白质
生物合成的基本过程?
答:
这是基因
表达
的第二步,产生基因产物蛋白质的最后阶段。不同的组织细胞具有不同的生理功能,是因为它们表达不同的基因,产生具有特殊功能的蛋白质,参与蛋白质生物合成的成份至少有200种,其主要体是由mRNA、tRNA、核糖
核蛋白
体以及有关的酶和蛋白质因子共同组成。
已知氨基酸序列
怎么
构建
原核
质粒
答:
如果你要直接在大肠杆菌中
表达
目的
蛋白
,然后用纯化的蛋白去
处理
黑色素瘤细胞,那你就应该用
原核
载体;如果你要在大肠杆菌中构建质粒,然后把质粒转染到哺乳细胞中表达目的蛋白,你就应该用
真核
载体.但无论哪种载体,构建和扩增质粒都是在大肠杆菌中进行的. 至于抗性基因,因为所有质粒都要在大肠杆菌中扩增,所...
人胰岛素原基因在大肠杆菌中
表达
的胰岛素原有无生物活性
答:
必经过改造时不会有的,
原核表达
系统是没有真核细胞中的蛋白成熟系统的,表达的肽链不能成熟,不具活性。当然可以通过对表达基因的改造,实现原核表达系统中
真核蛋白
的有活性表达
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